Utvärdering av en vätskekromatografisk kolonn med kombinerad retentionsmekanism
Ladda ner
Typ
Examensarbete på kandidatnivå
Program
Publicerad
2022
Författare
Allgén, Elin
Enarsson, Ellen
Hedström, Erik
Martinsson, Ingrid
Sarge, Henrik
Sellén, Hannes
Modellbyggare
Tidskriftstitel
ISSN
Volymtitel
Utgivare
Sammanfattning
Inom l¨akemedelsindustrin anv¨ands idag v¨atskekromatografiska separations- och analysmetoder
i stor omfattning f¨or produktutveckling och kvalitetskontroll. En vanlig metod ¨ar Reversed Pha se Liquid Chromatography d¨ar metanol ofta anv¨ands som l¨osningsmedel vid provberedning. Till
f¨oljd av metanolens h¨oga polaritet kan sv˚arigheter uppst˚a, framf¨orallt st¨ors f¨ordelningsj¨amvik ten mellan station¨arfasen och mobilfasen. Detta begr¨ansar m¨ojligheten att uppn˚a goda kroma tografiska resultat. Syftet med detta projekt var d¨arf¨or att unders¨oka kolonnen, Coresep 100,
vilken anv¨ander sig av b˚ade reversed phase- och jonbytesmekanism vid separation.
Kolonnen utv¨arderades genom att analysera sju substanser, som ¨ar vanliga vid metodutveck ling, utifr˚an de tre delproblemen: sameluering, l˚anga retentionstider och d˚alig toppsymmetri.
F¨or att f¨ors¨oka hitta l¨osningar till delproblemen genomf¨ordes analyser d¨ar olika parametrar va rierades. Parametrarna som unders¨oktes under detta projekt var fl¨odeshastighet, pumpgradient
och olika sammans¨attningar av mobilfasen, s˚asom dess pH och jonstyrka. Repeterbarheten f¨or
kolonnen utv¨arderades ocks˚a.
Den kombination av parametrar som uppvisade mest lovande resultat var en mobilfas med
pH 2,3; konstant saltkoncentration p˚a 70 mM NaCl, tillsammans med pumpgradienten 20-5
och en fl¨odeshastighet p˚a 0,8 ml/min. Utifr˚an de resultat som erh˚allits drogs slutsatsen att
kolonnen ¨ar l¨amplig f¨or vidare arbete, d˚a problem med sameluering ans˚ags kunna undvikas och
retentionstiderna bed¨omdes vara godtagbara. Ett vidare arbete ans˚ags kunna inrikta sig p˚a att
l¨osa det kvarst˚aende problemet med delvis bristande toppsymmetri och relativt breda toppar.