Kandidatarbete - Slutrapport Institutionen för kemi och kemiteknik KBTX16-23-08 Karakterisering av luftföroreningars inneh̊all En studie om luftburna partiklar och vad de best̊ar av Författare Kajsa Hallin Gustav Jansson Hanna Libander Robin Rydbergh Linnéa Svärd Martina Zarowiecki Handledare Per Malmberg Jonas Sjöblom Examinator Nikola Markovic 29 maj 2023 Förord Vi vill tacka v̊ara handledare Per Malmberg och Jonas Sjöblom för det stöd de gett oss under studien och för den tiden de lagt ner. Vi vill även tacka Mats Josefson för sin expertis i multivariat dataanalys. Utöver det vill vi även rikta ett tack till Chalmers bibliotek och fackspr̊aksavdelning som hjälpt oss genom skrivprocessen. i Sammandrag Sjukdomar orsakade av luftföroreningar är idag en av de största hoten mot v̊ar hälsa och orsa- kar att miljontals människor varje år dör i förtid. Orsaken till luftföroreningar är huvudsakligen förbränning av fossila bränslen och biomassa, samt föroreningar orsakade av trafik. Syftet med denna undersökning var att identifiera vilka partikelstorlekar som släpps ut i avgaser fr̊an diesel- motorer, slitage av bilbromsar samt förbränning av ved. Utöver detta undersöktes även källornas metallinneh̊all för att se vilken hälsofara partiklarna utgör. Undersökningen genomfördes i tre delar: en litteraturstudie kring luftburna partiklars och me- tallers hälsofara, insamling av partiklar samt analys av dessa. Insamlingen av partiklar gjordes med hjälp av en ELPI+, som delade upp partiklarna i olika storleksintervall. Dieselpartiklarna insamlades fr̊an en dieselmotor fr̊an Volvo av modell D13 utan katalysator i en testcell. Bromspar- tiklarna insamlades fr̊an en elbil i en fordonstestrig och partikelinsamlingen för ved utfördes vid en grill p̊a en allmän grillplats. Partiklarna fr̊an samtliga källor undersöktes sedan med ana- lysinstrumentet ToF-SIMS, varp̊a datan analyserades med analysprogrammet SIMCA. Därefter utfördes Kruskal-Wallis envägs variansanalys-test. Resultatet visade att de olika källorna skilde sig åt i b̊ade storleksfördelning och inneh̊all. Bland källorna uppvisades det att partiklarna fr̊an dieselmotorn generellt hade en större diameter i jämförelse med de andra tv̊a partielkällorna där vedpartiklarna generellt hade mindre diameter. Vid analys av samtliga prover identifierades närvaron av metallerna: litium, magnesium, kalcium, järn, krom och koppar. Utifr̊an dessa metaller upptäcktes en lägre andel detekterade joner bland vedproverna i jämförelse med övriga insamlingskällor. Det kunde även utläsas att partiklar med högre molmassor främst återfanns hos vedpartiklarna och att partiklarnas storlek p̊averkar dess sammansättning. Informationen fr̊an vald analysmetodik var begränsad i avseende p̊a kvantifieringsförm̊aga av metallinneh̊allet. Mängden metaller i partiklarna hade varit en betydande del i att bättre först̊a hälsoeffekterna av dessa luftburna föroreningar. Fortsatta studier behövs för att vidare undersöka vilka ytterligare ämnen dessa partiklar inneh̊aller och i vilken mängd de kan anträffas samt dess potentiella hälsop̊averkan. ii Characterization of the content in air pollution A study regarding airborne particles and what they consist of Abstract Diseases caused by air pollution are currently one of the biggest threats to our health, leading to millions of premature deaths each year. The primary sources of air pollution are the combustion of fossil fuels and biomass, as well as the pollution caused by traffic. The purpose of this study was to identify the particle sizes emitted in exhaust gas from diesel engines, the wear of car brakes, and the combustion of firewood. In addition, the metal content of the sources was investigated to determine the health risks posed by the particles. The study was conducted in three parts: a literature study on the health risks of airborne particles and metals, a gathering of particles, and an analysis of these particles. The gathering of particles was executed using an ELPI+, which separated the particles into different size ranges. Diesel particles were collected from a Volvo D13 diesel engine without a catalytic converter in a test cell. Brake particles were collected from an electric vehicle in a vehicle test rig, and the particles from firewood were collected from a grill in a public area. The particles from all sources were then examined using a ToF-SIMS analysis instrument, and the data were analyzed with the analysis software SIMCA. Subsequently, a Kruskal-Wallis one-way analysis of variance test was performed. The results showed that the particles from the different sources varied in both size distribution and content. Among the sources, it was found that the particles from the diesel engine generally had a larger diameter compared to the other two sources, where the firewood particles generally had the smallest diameter. Upon analysis of all samples were the presence of metals such as lithium, magnesium, calcium, iron, chromium, and copper identified. Based on these metals, a lower proportion of detected ions was found among the firewood samples compared to the other particle sources. It was also observed that particles with higher molecular weights were mainly found in the firewood particles and that the particles’ sizes affected their composition. The information from the selected analysis methodology was limited in terms of quantifying the metal content in particles. The quantification of the amount of metal in the particles would have been a significant factor in the continued investigation of the health effects of these airborne pollutants. Further studies are needed to investigate which additional substances these particles contain, the proportion in which they are found, and their potential health impact. iii Lista över förekommande akronymer ToF-SIMS Time of Flight Secondary Ion Mass Spectroscopy ELPI+ Electrical Low Preassure Impactor Kaskadimpaktor Ett instrument som sorterar partiklar baserat p̊a dess aerodynamiska diameter ppb Delar per miljard (10−9) ppq Delar per biljard (10−15) PM2,5 Partiklar med diameter lika med eller mindre än 2,5 µm MVDA Multivariat dataanalys PCA Principalkomponentanalys PLS Partiell minstakvadratkompletering PAH Polycykliska aromatiska kolväten Counts Antal detekterade joner iv Inneh̊all 1 Inledning 1 1.1 Syfte . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 1.2 Fr̊ageställningar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 1.3 Avgränsningar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 1.4 Etiska aspekter och miljöaspekter . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 2 Bakgrund 3 2.1 Partikelinneh̊all och partikelstorlekar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 2.1.1 Metaller . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 2.1.2 Polycykliska aromatiska kolväten . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 2.2 Partiklar i lungvävnad . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 2.3 Insamlings- och analysinstrument . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 2.3.1 Electrical Low Preassure Impactor . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 2.3.2 Masspektrometri . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 2.3.3 Time-of-Flight Secondary Ion Mass Spectrometer . . . . . . . . . . . . . . 6 2.4 Dataanalys . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7 2.4.1 Principalkomponentanalys (PCA) och partiell minstakvadratanpassning (PLS) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8 2.4.2 Kruskal-Wallis envägs variansanalys . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9 3 Metod 10 3.1 Insamling av partiklar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 3.2 Analys av partiklar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 4 Resultat 12 4.1 ELPI+ data . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12 4.1.1 Bromspartiklar fr̊an elbil . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12 4.1.2 Förbränning av ved . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13 4.1.3 Avgaser fr̊an dieselmotor . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 4.2 ToF-SIMS data . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15 4.3 Identifiering av ämnen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17 4.4 Statistisk analys . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17 4.5 Multivariat dataanalys . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18 4.5.1 Alla partikelkällor . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19 4.5.2 Bromspartiklar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20 4.5.3 Dieselpartiklar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21 4.5.4 Vedpartiklar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 4.5.5 Metallfördelning . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 5 Diskussion 25 5.1 Storlek- och massjämförelse . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 5.2 Sammansättning i partiklarna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 5.2.1 Vedpartiklarnas inneh̊all . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 5.3 SIMCA observationer . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27 5.4 Hälsoaspekter utifr̊an inneh̊all och storlek . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27 5.5 Felkällor . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28 5.6 Fortsatta studier . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29 v 6 Slutsater 30 Källförteckning 31 A1 Hantering av prover fr̊an ELPI+ I A2 XVar- plottar V A3 Python-kod VIII Shapiro-Wilks test . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . VIII Kruskal Wallis H-test . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . IX A4 Masspektran och isotopfördelningar XI Li . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . XI Mg . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . XV Ca . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . XIX Cr . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . XXIII Fe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . XXVII Cu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . XXXI Pb . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . XXXV vi 1 Inledning Under en minut andas en vuxen människa in och ut ungefär 60 liter luft och vid ansträngning kan denna siffra öka till 100 liter [1]. Dessutom är lungornas sammanslagna yta hos en vuxen människa 100 m2 och lungbl̊asornas väggar tunnare än en mikrometer. Gränsytan mellan lungorna och luften är allts̊a stor och därför har luftkvaliteten en ansenlig inverkan p̊a människors hälsa. Varje år orsakar luftburna partiklar otaliga dödsfall. Vid en ökning av 10 µm3 av PM2,5, allts̊a partiklar mindre än 2,5 µm i diameter, ökar antalet dödsfall under en m̊anad med 3,25 % [2]. P̊a grund av detta betraktas nu sjukdomar kopplade till exponering av luftföroreningar som ett av de största hoten mot v̊ar hälsa [3]. Enligt Världshälsoorganisationen WHO leder luftföroreningarna bland annat till ökad sjuklighet och död av hjärt-, kärl- och lungsjukdomar. Den mest drabbade kontinenten av luftföroreningar är Asien [4]. Detta är till följd av naturliga händelser s̊asom skogsbränder, men även antropogena och ekonomiska faktorer som exempelvis förbränning av kol och andra bränslen [4]. Ytterligare en källa till ökad luftförorening är den traditionella jordbruksmetoden svedjebruk som fortfarande används i m̊anga delar av Asien [2]. Metoden innebär att man bränner åkermarken för att förbättra jordkvaliteten vilket i sin tur bidrar till fler säsongsbetonade luftföroreningsutsläpp. Enligt en studie fr̊an Journal of Develop- ment Economics åstadkommer tio svedningsbränder inom samma omr̊ade en ökning p̊a 4,79 µm3 av PM2,5, vilket motsvarar en ökning p̊a 1,56 % av dödsfallen i dessa omr̊aden [2]. Fr̊agorna som m̊aste ställas är d̊a; vad är det hos partiklarna som utgör denna stora fara för människors hälsa? Är det endast partikelns storlek, eller har dess inneh̊all ocks̊a en inverkan i dess skadlighet? Enligt en studie i International Journal of Envirionmental Science and Tech- nology har det detekterats höga koncentrationer av metaller i luften i högtrafikerade omr̊aden [5]. De metaller som upptäcktes i högst koncentrationer fr̊an omr̊adena var zink, mangan, järn, bly, barium, antimon och koppar. Studien visade även att koncentrationerna av varje metall skiljde sig mellan l̊ag- och högtraffikerade omr̊aden. Koncentrationsgradienten av metaller var större mellan hög och l̊agtrafikerade omr̊aden för mindre partiklar än för större, där koncentra- tionen ans̊ags vara relativt konstant. Det finns fler studier som tyder p̊a att metaller förekommer p̊a sotpartiklar fr̊an fordon och att dessa partiklar har en annan hälsop̊averkan än de ämnen som släpps ut vid förbränning av organiska ämnen s̊asom ved [6]. Vid exempelvis upphettning och ofullständig förbränning av ved bildas istället hälsofarliga polycykliska aromatiska kolväten (PAH) vars hälsoeffekter anses m̊attliga vid diskontinuerlig exponering men att kontinuerlig ex- ponering kan vara cancerframkallande [7]. För att hantera luftföroreningarna inom EU finns regler och bestämmelser [8]. Dessa direktiv gäller dock l̊angt ifr̊an alla ämnen och utsläppskällor. En ökad först̊aelse kring partiklarnas storlek och inneh̊all är därför väsentligt för att f̊a en uppfattning om till vilken utsträckning partiklarna är skadliga för oss människor. Baserat p̊a den först̊aelsen kan nya direktiv sättas upp i framtiden. 1 1.1 Syfte Syftet med studien är att undersöka luftföroreningar fr̊an förbränning av ved, avgaser fr̊an en dieselmotor och partiklar fr̊an bromsarna hos en elbil med analystekniken ToF-SIMS. Detta för att utreda hur partiklarnas storlek och inneh̊all skiljer sig beroende p̊a källa. Ett resonemang kring hälsop̊averkan kommer även att göras baserat p̊a den framtagna informationen om metallinneh̊all i partikelkällorna. 1.2 Fr̊ageställningar För att uppn̊a syftet strävar arbetet efter att besvara följande fr̊agor. • Vilka ämnen, med fokus p̊a metaller, inneh̊aller partiklarna? • Hur skiljer sig partiklarna fr̊an olika föroreningskällor i avseende p̊a inneh̊all och stor- leksfördelning? • Vilka skillnader i sammansättning finns mellan partiklar av olika storlekar? • Vilka effekter kan partiklar fr̊an olika insamlingskällor ha p̊a människors hälsa? 1.3 Avgränsningar Projektet avgränsades till analys av totalt tre olika luftföroreningskällor. De luftföroreningar som valdes att studeras var avgaser fr̊an dieselmotor, förbränning av ved samt partiklar fr̊an bromsslitage. Det ans̊ags inte relevant att utöka provbredden inom dessa källor i avseende p̊a typ av dieselmotor, träslag eller typ av bromsar d̊a föroreningskällorna antogs vara representativa för andra föroreningskällor av samma typ. I projektet avgränsades metoden till användning av instrumenten ELPI+ och ToF-SIMS för att samla in respektive undersöka proverna. Därefter val- des analysverktygen SIMCA och Kruskal-Wallis envägs variansanalys-test för ytterligare analys. I studien har metallerna litium, magnesium, kalcium, krom, järn och koppar valts att undersökas. 1.4 Etiska aspekter och miljöaspekter Partikelutsläpp av metaller och PM2,5 p̊averkar b̊ade människors hälsa och miljön. Det är därför relevant att undersöka det kvalitativa inneh̊allet samt partikelstorlekarna i respektive källa. Resul- tatet fr̊an rapporten kan därmed leda till ökad först̊aelse kring föroreningar och dess hälsoeffekter p̊a människan. Uppmärksammande av dessa hälsoeffekterna kan resultera i att nya direktiv och lagar gällande utsläpp av luftburna föroreningar stiftas, vilket i slutändan kan leda till en bättre folkhälsa och renare miljö. Denna studie har ej involverat människo- eller djurförsök och har inte haft n̊agon avsevärd p̊averkan p̊a miljön, därför anses denna studie ej vara belastande ur ett etiskt eller samhällsmässigt perspektiv. 2 2 Bakgrund Studier visar att mindre partiklar, som PM2,5, kan orsaka större skada för människan jämfört med partiklar av större diameter [9]. Dessutom kan partiklars metallinneh̊all, allts̊a mängd me- tall i partiklarna och metalltyp, innebära stor p̊averkan p̊a människors hälsa [9]. Allts̊a har olika partikelstorlekar och partikelinneh̊all p̊averkan p̊a människan. Tekniska instrument som kan un- dersöka partiklar spelar därför stor roll för att f̊a först̊aelse för partiklarna och för att kunna avgöra vilka av dessa som utgör störst fara för människan. 2.1 Partikelinneh̊all och partikelstorlekar Enligt en studie publicerad i Atmosphere år 2021 uppskattas 6,7 miljoner människor att dö i förtid varje år till följd av luftföroreningar [9]. Högre koncentrationer av partiklar verkar ha en direkt koppling till andelen människor som dör i olika typer av lung-, hjärt- och kärlsjukdomar. Studi- en p̊avisar även att de viktigaste parametrarna kring partikelbeteende i människors och andra däggdjurs andningsorgan är partiklarnas storlek samt dess sammansättning. Hälsoeffekterna har bland annat visat sig vara större för partikelstorleken PM2,5 p̊a grund av fyra anledningar [9]. För det första inneh̊aller partiklarna i m̊anga fall högre koncentrationer av giftiga metaller samt att partiklarna, p̊a grund av deras storlek, lättare kan tränga sig djupt in i lungorna. Ytterligare en orsak är att lösligheten för metallerna p̊a partiklarna är högre vilket innebär att partiklarna har lättare att integreras i olika vävnader. Slutligen har människor längre exponeringstid för dessa metaller d̊a de befinner sig i luften under än längre tid än större partiklar som snabbare faller till marken. Exakt hur partiklarna åstadkommer dessa effekter är ännu inte fastställt och kan variera baserat p̊a bland annat sammansättningen i partiklarna. 2.1.1 Metaller En del partiklar inneh̊aller metaller. I Sverige exponeras människor av metaller främst genom livsmedel men även via luft och damm [10]. Transporter släpper ifr̊an sig metaller genom avga- ser samt via slitage av vägar, bromsar och däck [11]. Metaller finns naturligt i miljön s̊asom i berggrund, jord och vatten. Vissa metaller s̊asom zink, koppar och järn är i sm̊a mängder livsvik- tiga för levande organismer men kan i stora mängder vara cancerframkallande, ge störningar i hjärnutvecklingen samt skada inre organ [12]. Metaller kan dessutom inte brytas ner vilket in- nebär att det kan ta l̊ang tid innan metallhalterna i naturen minskar [10]. Hur mycket människor p̊averkas av metaller beror p̊a vilken metall det är. Krom är ett metalliskt grundämne som har ett stort användningsomr̊ade inom lädertillverkning samt inom tillverkningen av rostfritt st̊al [13]. Krom kan i för höga halter vara skadligt för människan där sexvärt krom anses utgöra störst hälsorisk. Sexvärt krom anses vara cancerframkallande och ha p̊averkan p̊a fertilitet. Om människohud utsätts för sexvärt krom kan det orsaka eksem och s̊arbildning [13]. Koppar har ocks̊a, i höga halter, negativ p̊averkan p̊a kroppen. Trafiken är största utsläppskällan för koppar d̊a bilars bromsbelägg inneh̊aller koppar som sprids i miljön varje g̊ang bilen bromsar [14]. Järn är en metall som är viktig för v̊ar syretransport i blodet [15]. Järn finns bland annat i form av hemjärn i blodproteinet hemoglobin som behövs för att transportera syre fr̊an lungorna ut till cellerna. Det finns även i musklerna i form av myoglobin och i en del enzymer. Järnet tas vanligast in via mat i form av hemjärn eller icke-hemjärn [16]. Hemjärnet, som är bundet till hemproteiner i till exempel hemoglobin, tas upp betydligt mer effektivt än icke-hemjärn [16]. Järn är skadligt i b̊ade höga och l̊aga koncentrationer. I ett avsnitt av Vetenskapens värld fr̊an 3 2020 nämns det att en stor del av järnpartiklarna fr̊an avgaser är s̊a pass sm̊a att de tar sig igenom människors nervbuntar och rakt in i hjärnan [17]. Vidare har det hittats ett samband mellan järnhalter i hjärnan och demens. [17]. Litium används inom flera vardagliga omr̊aden, däribland som läkemedel för bipolär sjukdom, i städprodukter och till batterier [18]. Metallen är farlig i höga doser och kan orsaka hjärntrötthet, kraftiga skakningar och koma. Ytterligare en metall är kalcium. Kalcium är en livsnödvändig metall som behövs vid blodkoagulering och bildande av tänder och skelett [19]. Överdosering av kalcium kan orsaka njurproblem. För att omsättningen av kalcium ska fungera behövs magnesium [20]. Magnesium är ocks̊a viktig för muskelfunktion och enzymatiska reaktioner i kroppen [21]. Effekter av för stort intag av magnesium inkluderar gastrointestinala effekter, yrsel och försämrad njurfunktion. Andra mer allvarliga symptom innefattar medvetslöshet och hjärtrytmrubbningar. L̊angvarig exponering av luftburet magnesium kan dessutom p̊averka lungorna. 2.1.2 Polycykliska aromatiska kolväten Polycykliska aromatiska kolväten (PAH) är olika grupper av kolväten som bildas när organiskt material ofullständigt förbränns eller hettas upp [22]. Det är vanligt att människor utsätts för PAH fr̊an luftföroreningar orsakade av trafik, vid förtäring av kraftigt grillade livsmedel och vid användning av snus eller cigaretter. Vissa polycykliska aromatiska kolväten har visat sig vara cancerogena samt vid mycket höga koncentrationer vara skadliga för levern och immunsystemet [22]. 2.2 Partiklar i lungvävnad Partiklar som är mindre än 5 µm tar sig l̊angt in i lungorna och ner i lungbl̊asorna medan partiklar som har större diameter fastnar i svalg, näsa och luftrör [23]. Deponering av partiklar i lungorna styrs främst av fenomenen impaktion, gravitationsdriven sedimentation och diffusion genom brownsk rörelse [24]. En studie publicerad i Environmental Research undersökte hur djupt olika typer av partiklar tränger sig in i lungorna utifr̊an storlek och sammansättning [25]. Dessa faktorer förklaras skilja sig fr̊an källa till källa, där exempelvis partiklar fr̊an förbränningskällor ofta är mindre med högre densitet medan partiklar fr̊an damm i naturen är större med lägre densitet. Fr̊an ovannämnd stu- die framkom det även att grövre partiklar än PM2,5 framförallt hamnar i trakeobronkialregionen (den inre luftvägsstrukturen best̊aende av luftstrupen som leder ut mot lungorna) men att de vid l̊ag densitet kan tränga sig djupare in i lungorna. Studien visade allts̊a att grövre partiklar med l̊ag densitet kan tränga djupare in i lungan än finare partiklar med hög densitet [25]. Detta innebär att det är möjligt att större partiklar med l̊ag densitet ocks̊a kan utgöra en stor fara för hälsan. 2.3 Insamlings- och analysinstrument I denna studie används de analytiska instrumenten ELPI+ och ToF-SIMS vid undersökning av proverna. ELPI+ används för uppsamling av partiklar där den sorterar partiklar med storlekar mellan 6 nm till 10 µm, ett intervall som studien utförs inom [26]. ToF-SIMS används för att f̊a en mer kvalitativ bild av partiklarna d̊a den ger data p̊a vilka ämnen partiklarna inneh̊aller. 4 2.3.1 Electrical Low Preassure Impactor ELPI (Electrical Low Preassure Impactor) är ett användbart instrument för att studera luft- kvalitet och föroreningar i luften. Instrumentet separerar ut partiklar fr̊an aerosoler och mäter sedan hur m̊anga partiklar av olika storlekar som aerosolen inneh̊aller [27]. ELPI best̊ar av en kaskadimpaktor och en elektrisk detektor. Instrumentet använder en vakuumpump för att suga in luft till kaskadimpaktorn. 3 Figur 1: Schematisk bild av tv̊a segment i en kaskadimpaktor. Ett segment best̊ar av ett munstycke och en uppsamlingsplatta markerat med ett streckat omr̊ade. Partiklarna flödar uppifr̊an och ner. En kaskadimpaktor separerar partiklar i en aerosol baserat p̊a dess storlek. Instrumentet är upp- byggt av ett antal segment staplade p̊a varandra, där varje segment best̊ar av ett munstycke och en uppsamlingsplatta, se figur 1 för en skiss av kaskadimpaktorn. I instrumentet färdas aerosolen genom munstycket p̊a varje segment, vilket ökar aerosolens hastighet. Efter munstycket behöver flödet ta en skarp sväng för att komma runt uppsamlingsplattan. Instrumentets separationsmeka- nism bygger p̊a att större partiklar i aerosolen har högre tröghet än mindre partiklar. Partiklarna i aerosolen med för hög tröghet kommer inte lyckas följa med flödets plötsliga förändring i rikt- ning och kommer därför att kollidera med uppsamlingsplattan i segmentet [28]. Hastigheten ökar vid varje segment längs med kaskadimpaktorn. P̊a detta sätt minskar de uppsamlade par- tiklarnas storlek för varje segment d̊a trögheten ökar med hastigheten. Varje munstycke har ett mönster och partiklarna som kolliderar med uppsamlingsytan under motsvarande munstycke lan- dar primärt i samma mönster och bildar fläckar av partiklar, se figur A1 i appendix A1 för bild p̊a hur partiklarna fördelar sig p̊a uppsamlingsytan. Den elektriska detektorn mäter mängden partiklar p̊a varje uppsamlingsplatta [27]. Detta är möjligt eftersom partiklarna laddas med en positiv spänningskälla innan de g̊ar in i impaktorn. Genom att mäta hur m̊anga partiklar som fastnar p̊a de olika plattorna kan storleksfördelningen av partiklar i aerosolen bestämmas. I arbetet används en ELPI+ fr̊an företaget DEKATI för att separera partiklar mellan 6 nm och 10 µm. Storleksintervallen för segmenten i kaskadimpaktorn visas i tabell 1 där D50% syftar till medelvärdet av partikelstorleken för motsvarande segment. Kaskadimpaktorn i detta instrument 5 best̊ar av 14 segment med munstycken och uppsamlingsplattor, se figur A2 och A3 i appendix A1 för bild p̊a ett munstycke respektive en uppsamlingsplatta. Denna ELPI+ har ocks̊a ett segment i botten utan uppsamlingsplatta (segment 1) samt en övre uppsamlingsplatta (uppsamlingsplatta 15) utan munstycke. Se figur A4 i appendix A1 för bild p̊a hela kaskadimpaktorn. Tabell 1: Medelvärde för storleken av partiklar för respektive segment i kaskadimpaktorn [27]. Segment 15 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 D50% [µm] 10 5,3 3,6 2,5 1,6 0,94 0,6 0,38 0,25 0,15 0,094 0,054 0,030 0,016 0,006 2.3.2 Masspektrometri Masspektrometri (MS) är en analytisk metod där ett prov joniseras för att sedan separeras i en massanalysator under vakuum, där detektorn utläser en jonvikt i slutet av analysatorn [29]. Vid jonisering klyvs molekyler till mindre laddade fragment. Graden av fragmentering beror p̊a hur h̊art provet joniserats [29]. Massanalysatorn utgörs av ett magnetfält där joner med större massa färdas l̊angsammare. När joner kolliderar med detektorn mäts jonströmmen och färdtiden [29]. Baserat p̊a detta kan ett masspektrum bildas. Masspektrumet presenterar den relativa intensiteten för alla m/z-värden. Ur masspektrumet kan hur vanligt förekommande en jon är relativt andra uppmätta jonslag i provet utläsas. 2.3.3 Time-of-Flight Secondary Ion Mass Spectrometer En speciell typ av MS är Time-of-flight Secondry Ion Mass Spectrometry (ToF-SIMS). Figur 2 visar en förenklad bild av hur instrumentet fungerar. Denna form av spektrometri använder en fokuserad jonstr̊ale som riktas mot en provyta. Jonstr̊alens syfte är att sl̊a loss de översta partiklarna fr̊an ytan vilka sedan kan analyseras. Här syftar partiklar till fragment som rubbas fr̊an ytan av de större inf̊angade partiklarna fr̊an föroreningar. Närmast kollisionsplatsen tenderar de p̊averkade fragmenten att best̊a av joner, medan längre bort fr̊an kollisionsplatsen lossnar större molekyler fr̊an ytan [30]. Joner som används i jonkanonen kan komma fr̊an bland annat guld, gallium, cesium och vismut. 6 Figur 2: Schematisk bild över de huvudsakliga delarna som utgör det analytiska instrumentet ToF-SIMS. Till höger i bilden är en förstoring av interaktionen p̊a ytan av provet vid analys. Efter att joner fr̊an jonkanonen kolliderar med provytan accelereras de partiklar som lossnar av ett elektriskt fält av känd styrka. Efter accelerationen förs partiklarna in i en flyg-tub med en reflektor i motsatt ände som reflekterar jonerna mot detektorn, se figur 2. Det är partiklarnas massa/laddnings-förh̊allande (m/z) som avgör partikelns hastighet och där igenom hur l̊ang tid det tar för partikeln att n̊a detektorn. Därför kan partiklarnas massa över laddning bestämmas genom att mäta hur länge de befinner sig i flyg-tuben, s̊a kallad ”Time-of-flight”[30]. Det som skiljer ToF-SIMS väsentligt fr̊an andra former av masspektrometriska metoder är att instrumentet kan svepa över en yta och analysera i flera olika punkter p̊a ytan [30]. Med andra ord, är det möjligt att skapa en bild av provytan där varje pixel i bilden är ett masspektrum av joner fr̊an isotoper och molekyler. Metoden har en hög känslighet och kan mäta joner i m/z precision ner till ppm och ppb. Massupplösningen är ca 8000 M/∆M vilket är en hög massupplösning som ger goda möjligheter att särskilja element med liknande atommassor. 2.4 Dataanalys Fr̊an ToF-SIMS genereras en stor mängd data med m̊anga dimensioner. Varje provyta analyseras separat i ToF-SIMS vilket genererar en bild per analyserad yta. Varje bild är uppbyggd av n×m stycken pixlar, för varje pixel finns det ett masspektrum. Signalen fr̊an varje pixel i bilden summeras för att bilda ett masspektrum som representerar hela den analyserade ytan. Alla toppar i detta masspektrum normaliseras sedan. För alla analyserade ytor bildas sedan en matris X där raderna utgörs av antal bilder, N , och kolonnerna utgörs av antal toppar i masspektrummet, K. Matris X är ett dataset som med fördel kan analyseras med multivariat dataanalys för att tolkas, för detta kan programmet SIMCA användas [31]. SIMCA kan bland annat applice- ra egenvärdesuppdelningsbaserade metoder för dimensionalitetsreduktion av multivariata data för att ta ett komplext problem och förenkla detta till likheter och skillnader i data. Meto- der för dimensionalitetsreduktion är bland annat principalkomponentanalys (PCA) och partiell minstakvadratanpassning (PLS). Fr̊an multivariat dataanalys identifieras relevanta skillnader i data även de som är subtila [32]. Genom att applicera Kruskal-Wallis envägs variansanalys test 7 kan dessa skillnader bekräftas med statistisk signifikans. 2.4.1 Principalkomponentanalys (PCA) och partiell minstakvadratanpassning (PLS) PCA baseras p̊a icke-väggledd klassificering, vilket innebär att modellen byggs upp baserat p̊a in- data fr̊an datamatris X [33]. PLS utnyttjar vägledd klassificering som byggs upp baserat p̊a b̊ade indata fr̊an datamatris X och utdata fr̊an responsmatris Y. För b̊ade PCA och PLS reduceras datamatrisen X med dimensionerna N ×K till A stycken principal komponenter. Detta innebär en dimensionsreducering fr̊an N till A. Genom att spänna upp ett multidimensionellt rum med K koordinataxlar kan alla masspektra N plottas i koordinatsystemet [34]. Genom att vrida ko- ordinataxlarna K och projicera punkterna N p̊a respektive axel, hittas de linjärkombinationer av punkter N som ger störst variation. De nya axlarna är egenvektorerna och principalkompo- nenterna som bygger upp loadingsmatrisen L [35] [36]. Projektionerna av datapunkter p̊a de nya axlarna kallas scores [35] [36]. Principalkomponenter fördelas i en hierarkisk ordning där PC1 är den principalkomponent med störst varians [35]. Ekvation 1 visar hur datamatrisen X kan beskrivas med scoresmatrisen SN×A, loadingmatrisen LA×K och residualmatrisen EN×K [36] [37]. Stora residualer i matris E innebär att data inte passar in i modellen väl [38]. En DModX graf är ett sätt att visualisera E och kan användas för att avgöra hur väl data passar till modellen. X = SLT +E (1) PLS utnyttjar ocks̊a principalkomponenter för att minska antalet dimensioner, men här görs det b̊ade för datamatrisen X och responsmatrisen Y [39]. I fallet för PLS-DA inneh̊aller responsma- trisen Y, klasserna som data i X tillhör. Responsmatrisen YN×Q kan p̊a liknande sätt som för X beskrivas, med scoresmatrisen CN×H , loadingsmatrisen GH×Q och residualmatrisen FN×Q, se ekvation 2. Målet med PLS är att maximera kovariansen mellan S och C genom att variera X och Y matrisernas komponenter. Y = CGT + F (2) När principalkomponenterna erh̊alls kan scoresscatter-plottar, loadingscatter-plottar och XVar- plottar tas fram för b̊ade PLS och PCA för vidare analys. En scoresscatter-plot (scoresplott) och en loadingsscatter-plot (loadingsplott) visar alla scores respektive loadings fr̊an de principalkom- ponenterna som studeras. Loadingsplottar och scoresplottar bör läsas av tillsammans eftersom de är kopplade till varandra. Exempel p̊a det kan illustreras med figur 13 och 14 i resultatet. Proverna för ved i scoresplotten drar åt vänster, i loadingsplotten kan de m/z-värden till vänster därmed sägas ha en större betydelse för dessa prover. Fr̊an en loadingsplot kan vikten av principalkomponenten identifieras, punkter som ansamlas p̊a samma ställe i grafen har en positiv korrelation och punkter p̊a motsatta sidor av origo har en negativ korrelation [38]. Scoresplotten visar trender och grupperingar av data [35], en ansamling 8 av data innebär att dessa punkter har en gemensam variation av intensitet för ett eller flera m/z-värden. En XVar-plott visar hur stark signalen fr̊an ettm/z-värde är för olika prover. Figur A6 i appendix A2 visar en XVar-plott med signal för litium fr̊an alla prover. I figuren visar x-axeln alla prover och y-axeln är den relativa intensiteten uppmätt för litium i proverna. Plotten ger en bild av förekomsten av ämnet i de olika proverna. Vid PCA modellering av ToF-SIMS data i SIMCA används ofta pareto-skalning för att balansera variabler vilket p̊averkar b̊ade scores- och loadingsplottar. Det gör att prover med liknande ska- lade m/z-värden placeras nära varandra i scoreplotten medan loadingspunkterna blir jämförbara och reflekterar vikten av varje m/z-värde. Detta underlättar tolkningen av plottarna. 2.4.2 Kruskal-Wallis envägs variansanalys Kruskal–Wallis envägs variansanalys är ett icke-parametriskt test som används för att jämföra tre eller flera oberoende gruppers rangordnade medelvärde [40]. Fr̊an Kruskal-Wallis kan man f̊a ett p-värde som kan användas för att förkasta eller acceptera nollhypotesen. Till skillnad fr̊an klassisk ANOVA kräver inte denna metoden att data är normalfördelad. Kraven för Kruskal-Wallis test är att data ska vara oberoende och grupperna ska ha liknande form p̊a deras fördelning [41]. Vid Kruskal-Wallis test har varje datapunkt i gruppen ett tillsatt rangvärde. Vid fallet av mas- spektrometrisk data tillsätts en rang till det relativa intensitetvärdet. Det minsta intensitetvärdet f̊ar rang 1 och det näst minsta f̊ar rang 2. Därefter tas medelvärdet av varje grupps rang och det är detta värde som testas med Kruskal-Wallis. Nollhypotesen, H0, är att medelvärdet av gruppens rang är samma mellan grupperna. Den alternativa hypotesen, H1, är att åtminstone ett av gruppernas rangmedelvärde skiljer sig fr̊an resterande. Variansanalys är att föredra framför t-test i de fall där fler än tv̊a grupper studeras [42]. Detta eftersom variansanalys har en fast sannolikhet p̊a signifikansniv̊a α att göra typ I-fel, vilket är att nollhypotesen förkastas när den faktiskt är sann. Vid t-test kan endast tv̊a medelvärden jämföras åt g̊angen, annars ökar risken för typ I-fel. Vid n utförda t-test kan sannolikheten för typ I-fel beräknas enligt ekvation 3 [42]. Sannolikhet Typ I-fel = 1− (1− α)n (3) Kruskal-Wallis test visar om det finns en signifikant skillnad mellan gruppernas rangordning eller inte. För att identifiera vilka gruppers rangordning som skiljer sig åt utförs Dunns post-hoc-test. För att använda Dunns post-hoc-test behöver H0 förkastas [43]. 9 3 Metod För att samla in, bearbeta och analysera partiklarna användes ett flertal instrument och analys- metoder. Metoden utvecklades under projektets g̊ang och handledarna till projektet: Per Malm- berg och Jonas Sjöblom, har kontinuerligt konsulterats. 3.1 Insamling av partiklar Uppsamlingen av partiklarna fr̊an föroreningskällorna utfördes med hjälp av instrumentet EL- PI+. För att samla upp partiklarna placerades runda diskar av aluminiumfolie p̊a uppsamlings- ytorna. För att partiklarna säkert skulle fastna p̊a aluminiumytorna applicerades även en bit dubbelhäftande tejp p̊a aluminiumfolien. Tejpen var fri fr̊an silikonoljor, vilket är av stor vikt d̊a den senare analysen i ToF-SIMS hade störts av dessa. Uppsamlingsplattorna med aluminiumfolie och tejp placerades sedan i ELPI+. Den första partikelinsamlingen som utfördes var av bromspartiklar fr̊an en elbil. Denna insamling av partiklar genomfördes i ett simuleringslaboratorium i ledning av projektets handledare Jonas Sjöblom. Prov samlades fr̊an en av elbilens bromsdiskar. Mynningen p̊a insamlingsslangen till ELPI+ placerades ungefär 30 cm fr̊an bromsdiskarna och elbilen styrdes sedan via ett kontroll- rum. Elbilen kördes i cykler av att gasa upp till 110 km/h för att sedan bromsa till 10 km/h. Denna cykel upprepades i cirka en timme och partiklar insamlades kontinuerligt under tiden. Den andra partikelinsamlingen som utfördes var vid förbränning av ved. Denna insamling ge- nomfördes p̊a en trafikfri öppen grusplan med n̊agra f̊a träd. Ved antändes i en grill och ELPI+ matades med partiklar genom en slang som placerades p̊a 1-2 meters avst̊and fr̊an elden, se figur A5 i appendix A1 för bild p̊a grillen. Röken fr̊an elden bl̊aste i varierande m̊an mot insam- lingsslangen. Insamlingen fortgick i tv̊a timmar och till elden lades torr ved och fallna pinnar under hela eldningen. När elden p̊ag̊att i en timme, grillades korv över elden för att simulera en korvgrillning. Den tredje och sista insamlingen av partiklar gjordes p̊a en dieselmotor av modell D13 fr̊an Volvo utan katalysator. Motorn befann sig i en testcell och styrdes fr̊an ett kontrollrum. Avgaserna späddes ut med tryckluft för att avgasblandningen skulle n̊a en koncentration av partiklar som ELPI+ kunde mäta. Instrumentet kan inte mäta om koncentrationen blir för hög. Körningen av motorn anpassades för att simulera en äldre lastbilsmotor. Detta gjordes genom att sänka trycket p̊a bränsleinsprutningen s̊a att förbränningen blev mindre effektiv och genererade mer sot och partiklar. Insamlingen av partiklar startades samtidigt som motorn startades och mätningen p̊agick i 20 minuter. Efter varje mätning plockades aluminiumfolierna ut ur ELPI+ och numrerades efter motsvarande uppsamlingsplatta 2-15. De placerades därefter i en platt l̊ada och täcktes över med aluminium- folie för att inte p̊averkas av flytt eller förvaring. 3.2 Analys av partiklar Efter insamling av partiklar fr̊an de tre föroreningskällorna fördes aluminiumfolierna in i en ToF-SIMS för analys. För varje folie, togs i största möjliga m̊an tre bilder. En utzoomad bild p̊a en fläck av partiklar där omkringliggande tejp syntes, samt tv̊a inzoomade bilder p̊a tv̊a skilda fläckar. N̊agra undantag fanns dock. P̊a de folier där inga fläckar kunde ses, med varken blotta ögat eller genom det inbyggda mikroskopet i ToF-SIMS, togs inga bilder. För bromspartiklarna 10 har generellt tv̊a bilder tagits, en utzoomad bild med tejp och fläck samt en p̊a kanten av fläcken. De vida bilderna beskärdes i efterhand för att efterlikna de mittenbilder som tagits p̊a de andra folierna där ingen tejp var med p̊a bilden. Prov 4, 5 och 6 för ved samt prov 6 för diesel hade utöver svarta fläckar ocks̊a bruna partier. Extra bilder togs p̊a de bruna partierna för dessa prover. Efter att samtliga bilder p̊a aluminiumfolierna tagits, kalibrerades dess masspektrum mot samma 3-5 kalibranter. Därefter konstruerades en masslista över alla m/z-värden som hade en gaussisk topp minst fem g̊anger starkare än signalbruset i n̊agot av proven. Antal uppmätta joner för m/z- värdena i masslistan normaliserades mot totala antalet joner uppmätta för de olika proverna. Denna data undersöktes sedan vidare med bland annat SIMCA. Med SIMCA undersöktes det ifall proverna uppvisade trender som kunde upptäckas med hjälp av multivariat dataanalys. Egenvärdesuppdelningsbaserade metoder för dimensionalitetsreduktion användes, specifikt PLS- DA för enskilda insamlingskällor, medan PCA-X användes vid jämförelse mellan partikelkällorna. Utifr̊an dessa modeller konstruerades scoresscatter-plottar, loadingsscatter-plottar och XVar- plottar. För att med statistisk signifikans validera de erh̊allna resultaten utfördes Kruskal-Wallis envägs variansanalys test. Ett Shapiro-Wilks test utfördes i första hand för att undersöka ifall data var normalfördelat. Variansanalysen följdes upp med ett Dunns post-hoc-test. Samtliga statistiska analyser programmerades i Python. Koden som användes återfinns i appendix A3. 11 4 Resultat I följande avsnitt presenteras de resultat och analyser som gjorts baserat p̊a partiklarnas storlek och sammansättning utifr̊an de valda källorna: förbränning av ved, avgaser fr̊an en dieselmotor samt slitage av en bilbroms. Varje föroreningskällas resultat presenteras var för sig. 4.1 ELPI+ data Genom analys med instrumentet ELPI+ har diagram för partiklarna fr̊an samtliga källor som undersökts kunnat sammanställas. ELPI+ ger information om partiklarnas storlek, massa och antal. Partiklarnas storleksfördelning med avseende p̊a antal och massa visualiseras med hjälp av plottar i följande avsnitt 4.1.1 - 4.1.3. 4.1.1 Bromspartiklar fr̊an elbil Partiklarna som genererades i bromsinsamlingen visualiseras i figur 3. Figuren visar antalet detekterade partiklar per kubikcentimeter plottade mot dess partikeldiameter. Av de insamlade partiklarna hade störst andel partiklar en diameter mellan 0,006 µm och 0,05 µm, som innefattas i PM2,5 d̊a de har en diameter mindre än 2,5 µm. Storleken med högst koncentration är 0,02 µm och antal detekterade partiklar vid denna diameter är ungefär 1, 4 · 107 partiklar/cm3. Figur 3: Antal partiklar av olika storlekar insamlade fr̊an en bromsande elbil. Antal partiklar uppmätta per kubikcentimeter plottades mot dess partikeldiametern i µm. Skalan för partikeldiameter är logaritmisk. Figur 4 redogör massfördelningen för broms genom att visa partiklarnas totala massa per volym plottat mot dess diameter. Genom att plotta partiklarnas sammanlagda massa vid varje steg mot partikeldiametern tydliggörs att de partiklar med större diameter utgör mer av den totala massan i aerosolen än de mindre partiklarna som är fler till antalet. Partiklarna för den diameter som i storleksfördelningsdiagrammet utgör den högsta toppen har en massa p̊a ungefär 0,1 mg/m3. Intervallet av partiklar med en diameter mellan 0,2 µm till 8 µm utgör största delen av aerosolens massa. Den högsta toppen i figur 4 tyder p̊a att partiklar med en diameter p̊a 2,5 µm till 5 µm har tillsammans störst massa av de olika partiklarna i aerosolen. Denna massa ligger runt 4 mg/m3. 12 Figur 4: De insamlade bromspartiklarnas massfördelning. Partiklarnas massa per volym i mg/m3 är plottad mot dess partikeldiameter i µm. Skalan för partikeldiameter är logaritmisk. 4.1.2 Förbränning av ved ELPI+ data fr̊an de partiklar som samlades in vid förbränning av ved har sammanställts p̊a samma sätt som data för bromspartiklarna. I figur 5 nedan har koncentrationen, antal partiklar per cm3, plottats mot partikeldiametern (µm) p̊a samma sätt som för bromspartiklarna. Ur figur 5 framg̊ar det att största delen av partiklarna hade en diameter p̊a 0,006 µm till 0,3 µm, varav flest partiklar hade en diameter p̊a 0,015 µm. Antal partiklar som detekterades vid denna diameter var ungefär 1, 25 · 107 partiklar/cm3. Figur 5: Antal partiklar av olika storlekar insamlade vid vedeldning. Antal partiklar uppmätta per kubik- centimeter plottades mot dess partikeldiametern i µm. Skalan för partikeldiameter är logaritmisk. För de uppsamlade vedpartiklarna redogör figur 6 massfördelningen. Där massan partiklar per kubikmeter plottade mot partikeldiameter i logaritmisk skala. Intervallet av partiklar med en diameter av 0,03 µm till 0,7 µm utgör största delen av aerosolens massa. Den största detekterade massan inom detta intervall är 0,55 mg/m3. Det finns även ett mindre massbidrag fr̊an n̊agot större partiklar med en diameter fr̊an 1,5 µm till 3 µm. Diagrammet visar dessutom en liten topp 13 p̊a 0,02 mg/m3 vid diametern 0,015 µm. Figur 6: De insamlade vedpartiklarnas massfördelning. Partiklarnas massa per volym i mg/m3 är plottad mot dess partikeldiameter i µm. Skalan för partikeldiameter är logaritmisk. 4.1.3 Avgaser fr̊an dieselmotor Tredje partikelkällan som analyserades med ELPI+ var dieselmotorn. Den genererade ett stort antal partiklar inom ett bredare spann av partikelstorlekar än de tidigare föroreningskällorna. Figur 7 visar koncentrationen partiklar med olika stor diameter. Koncentrationen av partiklar fr̊an dieselmotorn är hög för partiklar med en diameter mellan 0,007 µm och 0,4 µm. Högst koncentration har partiklar med diametern 0,08 µm och antal detekterade partiklar vid denna diameter är ungefär 1, 45 ·106 partiklar/cm3. Diagrammet visar även en lägre topp vid diametern 0,015 µm p̊a ungefär 8, 0 · 105 partiklar/cm3. Figur 7: Antal partiklar av olika storlekar insamlade fr̊an en dieselmotor. Antal partiklar uppmätta per kubikcentimeter plottades mot dess partikeldiametern i µm. Skalan för partikeldiameter är logaritmisk. För de uppsamlade dieselpartiklarna redogör figur 8 massfördelningen där massan partiklar per kubikmeter plottades mot partikeldiametern i logaritmisk skala. Intervallet av partiklar med en diameter mellan 0,04 µm till 8 µm utgör största delen av aerosolens massa. Det största massbidraget kommer fr̊an partiklar med en diameter runt 0,15 µm samt 2,2 µm. Den diameter 14 med störst antal detekterade partiklar (0,08 µm) fr̊an figur 7 visar i figur 8 en partikelmassa p̊a 0,3 mg/m3. Figur 8: De insamlade dieselpartiklarnas massfördelning. Partiklarnas massa per volym i mg/m3 är plottad mot dess partikeldiameter i µm. Skalan för partikeldiameter är logaritmisk. 4.2 ToF-SIMS data ToF-SIMS-instrumentet genererade data i form av bilder. Exempel p̊a bilder som skapades vi- sas i figurerna 10 och 11. De största partiklarna som detekterades hamnade p̊a platta 15 i kaskadimpaktorn. Dessa partiklar har en diameter p̊a 10 µm. Figur 9 visar att de insamlade bromspartiklarna bildar agglomerat med en diameter upp till 200 µm p̊a en yta av dubbelhäftad tejp. Figur 9: Figuren visar bromspartiklar med en diameter större än 5, 3 µm. Bilden är tagen med ett optiskt mikroskop som används vid förhandsgranskning i ToF-SIMS. Den totala signalen av bromspartiklarna p̊a uppsamlingsplatta 15 vid analys med ToF-SIMS visas i figur 10. Figuren visar att signal även detekteras fr̊an bakgrunden d̊a tejpens yta inte är helt täckt av partiklar. Ytan är samma som i figur 9 och best̊ar av partiklar fr̊an broms större än 5,3 µm. Ljusa omr̊aden i bilden motsvarar starkast jonsignal. 15 Figur 10: Total jonsignal fr̊an en yta som analyserats med ToF-SIMS. Signalen fr̊an järn- och zinkjoner visas bredvid varandra i figur 11. Signalen kommer endast fr̊an bromspartiklarna vilket tyder p̊a att det finns b̊ade järn och zink p̊a ytan av partiklarna, samt att det finns mer järn än zink i detta prov. Figur 11: Detekterade signaler av järn och zink i samma prov som visas i figur 9 och 10 med bromspar- tiklar större än 5, 3 µm. Till vänster: signal fr̊an järn, till höger: signal fr̊an zink Partiklarna som hamnar p̊a uppsamlingsyta 15 har en storlek som g̊ar att se med blotta ögat och har oregelbunden form. De mindre partikelstorlekarna bildar ett homogent lager över uppsam- lingsytan vilket gör att enskilda partiklar ej g̊ar att urskilja lika väl med blotta ögat eller med optiskt mikroskop. För dessa sm̊a provstorlekar ger bildens laterala upplösning inte lika mycket information. Istället har antal detekterade joner av ett visst slag normaliserats mot det totala 16 antalet detekterade joner. Denna normaliserade data analyseras vidare i kommande avsnitt med hjälp av multivariat dataanalys. 4.3 Identifiering av ämnen Genom tolkning av masspektra ur mjukvara för ToF-SIMS samt isotopfördelningar kunde följande metallers närvaro i proverna bekräftas: litium, magnesium, kalcium, krom, järn och koppar. Fortsättningsvis kunde inneh̊all av metallerna kadmium, kvicksilver och bly ej p̊avisas i n̊agot av proverna. Omgivande masspektra för alla identifierade metaller i de undersökta partikelkällorna finns i figur A12 till A34 i appendix A4. Dessa masspektran stödjer identifikationen av de aktuella metallerna. Isotopfördelningar finns ocks̊a som underlag för varje identifierad metall i appendix A4 fr̊an figur A15 till A35 för att styrka riktigheten av identifieringen av metallerna. Masspektrum och isotopfördelning för specifikt bly finns i appendix A4 fr̊an figur A36 till A39 för att p̊avisa att dess närvaro är osannolik. Ur masspektra för alla vedproverna g̊ar det att observera en upprepning av toppar. Dessa toppar börjar med en större signal vid cirka m/z = 80 och fortsätter med avtagande intensitet till förbi m/z = 500. Det g̊ar att delvis sk̊ada detta för vedproverna i figur A36 i appendix. Det är även observerat att detta fenomen existerar i en längre intensitet för broms- och dieselproverna. 4.4 Statistisk analys För att undersöka om vissa ämnen förekommer mer i vissa föroreningskällor än andra används Kruskal-Wallis envägs variansanalys-test. Först testas om populationerna är normalfördelade med Shapiro-Wilks test för p0 = 0,05, vilket visar att 55 av 668 m/z-värden fr̊an masslistan är normalfördelade för samtliga föroreningskällor, vilket motsvarar ∼8 %. I och med att en s̊a l̊ag andel av mätdata är normalfördelad valdes ett icke-parametriskt test för vidare statistisk analys istället för envägs variansanalys. Koppar är en av metallerna som identifierades med hjälp av dess isotopsfördelning. Efter ka- librering visade koppar ett m/z-värde runt 62, 9526. Figur 12 visar ett l̊addiagram över den normaliserade intensiteten för koppar mot den totala intensiteten fr̊an samtliga prover. 17 Figur 12: L̊addiagram över intensiteten fr̊an koppar för samtliga prover fr̊an de olika föroreningskällorna samt blankproven. Strecket genom l̊adan visar medianvärdet. L̊adan inneh̊aller 50 % av värdena. Data- punkterna representeras av cirklar och avvikande datapunkter markeras med stjärnor utanför l̊adornas min/max-värde. Med hjälp av Kruskal-Wallis test undersöktes om den detekterade mängden koppar skiljer sig med en statistisk signifikans mellan de olika källorna. Testet gav p-värdet: 0,0017 vilket för p0 = 0,05 är tillräckligt för att förkasta nollhypotesen. Koden som användes för att utföra testet återfinns i appendix under avsnitt A3. Eftersom nollhypotesen förkastades genomfördes Dunns post-hoc-test med p0 = 0,05, fr̊an vilket resultatet listas i tabell 2. Enligt Dunns test förkastas nollhypotesen för samtliga kombinationer utom diesel - ved. Detta innebär att samtliga föroreningskällor inneh̊aller signifikant mer koppar än blankprovet, samt att aerosolen fr̊an bromsskivan inneh̊aller signifikant mer koppar än de andra föroreningskällorna. Tabell 2: Resultat fr̊an Dunn’s post-hoc test för koppar. Prov p-värde Nollhypotes förkastas Blank - Broms 0, 49 · 10−3 Sant Blank - Diesel 0, 030 Sant Blank - Ved 0, 013 Sant Broms - Diesel 4, 5 · 10−3 Sant Broms - Ved 0, 028 Sant Diesel - Ved 0, 45 Falskt 4.5 Multivariat dataanalys De masspektrometriska intensitetsvärdena för de tre olika föroreningskällorna samt blankprover lades in i SIMCA. Där utfördes multivariat dataanalys med hjälp av olika matematiska modeller för att först̊a samband och skillnader mellan proverna. 18 4.5.1 Alla partikelkällor För att bekräfta att partiklarna skiljer sig i inneh̊all gjordes en oviktad analys med en PCA- X modell och utifr̊an den skapades en scores- och en loadingsplott, se figur 13 respektive figur 14. Detta dataset är ocks̊a logaritmiskt transformerat och pareto-skalat. I dataanpassningen i figur 13 förklarar den första principialkomponenten (PC1) 58,7 % av variationen och den andra principialkomponenten (PC2) ytterligare 17,6 % av variationen. Tillsammans förklarar PC1 och PC2 76,3 % av den totala variationen i datamängden. Figur 13 visar prickar i olika färger fr̊an de olika källorna och blankproverna. Svarta prickar är för broms, orange är för diesel, grön är för ved och bl̊a är för blankprover. Nomenklaturen för utskrivna namn inkluderar en bokstav för varje källa där V är ved, 0 är blankprov med tejp, B är broms och D är diesel. Efter hänvisningen till partikelkällan visar respektive siffra vilket segment i ELPI+ provet kommer ifr̊an. Partikelstorleken som provsiffran refererar till återfinns i tabell 1. Slutligen skrivs bildtypen ut i form av ett M följt av en siffra. Detta betyder att bilden är tagen i mitten av en partikelfläck, där siffran beskriver vilken fläck i samma provstorlek bilden togs p̊a. Ovalen i diagrammet är en grafisk representation av en 95 % konfidensregion för dataanpassningen. Figur 13: En scoresplott över hur de tre insamlingskällornas partiklar förh̊aller sig till varandra. I figur 13 g̊ar det att ur scores-diagrammet observera grupperingar av alla de olika källorna där de bildar egna kluster, vilket indikerar skillnader i källornas kemiska profiler. Klustret för vedpartiklarna separerar sig mer fr̊an de andra källornas kluster vilket p̊avisar att vedpartiklarna skiljer sig mest i kemiskt inneh̊all fr̊an resten. Broms- och dieselpartiklarnas kluster är inte lika separerade fr̊an varandra. Loadingsplotten i figur 14 inneh̊aller prickar som representerar specifika m/z-värden. Prickarna är färglagda med en gradient, fr̊an lägre m/z till högre, i en färgskala fr̊an bl̊att till grönt till rött. Här visas de viktigaste variablerna som bidrar till separationen av provgrupperna i scoresplotten. De variabler som är i samma region av diagrammet är de variabler som främst karaktäriserar 19 proverna. Utifr̊an en jämförelse mellan figur 13 och 14 kan det observeras att de ämnen med högre molmassor framförallt befinner sig bland vedpartiklarna. Figur 14: En loadingsplot som visar fördelningen av partiklarnas molmassa fr̊an de tre insam- lingskällorna. 4.5.2 Bromspartiklar Genomförd multivariatanalys med PLS-DA modell för blankprover kombinerat med broms-, diesel- och vedprover resulterade i tre uppsättningar av scores- och loadingsplottar samman- ställda i figurerna 15, 16 och 17. Dessa dataset är logaritmiskt transformerade och pareto-skalade. Datapassningen i figur 15 förklarar den första principialkomponenten (PC1) 51,4 % av variatio- nen och den andra principialkomponenten (PC2) ytterligare 23,3 % av variationen. Tillsammans förklarar PC1 och PC2 74,7 % av den totala variationen i datamängden. I figur 15 i scores dia- grammet g̊ar det att identifiera en linjeformad separation inom klustret för bromsprover. Detta innebär att bromsproverna skiljer sig fr̊an varandra. Utifr̊an provnamnen som är kopplade till partikelstorlek, urskiljs en viss trend fr̊an nedre delen av diagrammet till övre. Genom att jämföra bromsprovernas loadingsplott och scoresplott g̊ar det att konstatera att m/z- värdena i andra kvadranten är viktiga för att förklara de större partiklarnas kemiska profiler. Liknande kunde det konstateras att m/z-värden i tredje kvadranten är viktiga för att förklara de mindre partiklarnas kemiska profiler. 20 Figur 15: En scores scatter plot till vänster och en loadings scatter plot till höger för bromspartiklar av olika storlek tillsammans med tre blankprover. Se anknytande texter till figur 13 och 14 för tolkningsan- visning. 4.5.3 Dieselpartiklar Dataanpassningen i figur 16 förklarar den första principialkomponenten (PC1) 53,1 % av variatio- nen och den andra principialkomponenten (PC2) ytterligare 14,0 % av variationen. Tillsammans förklarar PC1 och PC2 67,1 % av den totala variationen i datamängden. I figur 16 g̊ar det att i scores diagrammet tyda en större separation inom klustret för dieselproverna. Detta innebär att dieselproverna uppvisar större skillnader sinsemellan, men däremot framträder inte n̊agon trend utefter partikelstorlek och totalinneh̊all för dieselproverna. I loadingsplotten g̊ar det att utifr̊an en jämförelse med scoresplotten konstatera att de m/z-värdena i första kvadranten är viktigast för förklarande av den kemiska profilen för dieselprover. Figur 16: En score scatter plott till vänster och en loadings scatter plott till höger för dieselpartiklar av olika storlek tillsammans med tre blankprover. Se anknytande texter till figur 13 och 14 för tolkningsan- visning. 21 4.5.4 Vedpartiklar I datapassningen i figur 17 förklarar den första principialkomponenten (PC1) 87,5 % av variatio- nen och den andra principialkomponenten (PC2) ytterligare 6,4 % av variationen. Tillsammans förklarar PC1 och PC2 93,9 % av den totala variationen i datamängden. I figur 17 i scores diagrammet identifierades en linjär separation inom klustret för vedproverna som innebär att vedproverna skiljer sig fr̊an varandra. Utifr̊an provnamnen som är kopplade till partikelstorle- karna urskiljs även en trend med större partikelstorlekar i den nedre delen av diagrammet och mindre i den övre delen. Genom att jämföra vedprovernas loadingsplott och scoresplott g̊ar det att konstatera att m/z- värdena i första kvadranten är viktiga för att förklara de mindre partiklarnas kemiska profil. Liknande kunde det konstateras att m/z-värdena i fjärde kvadranten är viktiga för att förklara de större partiklarnas kemiska profil. Det finns även en gruppering av m/z-värden p̊a högra halvplan längs x-axeln med ämnen som gemensamt kännetecknar vedprovernas skillnad fr̊an blankproverna. Figur 17: En score scatter plott till vänster och en loadings scatter plott till höger för vedpartiklar av olika storlek tillsammans med tre blankprover. Se anknytande texter till figur 13 och 14 för tolkningsanvisning. 4.5.5 Metallfördelning Figurerna 18-20 representerar endast relativ ämnesfördelning baserat p̊a uppmätta signaler fr̊an ToF-SIMS. Eftersom ToF-SIMS endast analyserar en utvald plats av ytan, ger detta inte en representativ bild av partikelkällornas faktiska ämnesfördelningar. Det bör även nämnas att ToF-SIMS kan vara olika känslig för olika ämnen och att andelen counts därför inte ger en representativ bild av koncentrationen. Fr̊an figur 18 kan de tv̊a metallerna med högst andel counts hos bromsproverna identifieras som magnesium och kalcium. Partiklarna som identifieras har en storlek mellan 0,19-7,3 µm. För magnesium identifieras en upp̊atg̊aende trend med ökande diameter, där den största andelen counts p̊a 0,48 % är vid partikelstorleken 4,4 µm, innan andelen counts sedan minskar. Kalciums största utslag p̊a 0,41 % av totala andelen counts ligger vid 3 µm. Övriga undersökta metallers utslag är nära noll. 22 Figur 18: Andel av den totala mängden uppmätta counts för olika metaller bland bromsproverna plottade mot dess partikeldiameter. Vid analys av figur 19 kan de tv̊a metallerna med högst andel counts hos dieselproverna iden- tifieras som kalcium och järn. Partiklarna som identifieras har en storlek mellan 0,022-2,0 µm. För kalcium hittas dess största andel counts p̊a 0,28 % respektive 0,29 % av den totala mängden counts vid tv̊a separata toppar med partikelstorlek 0,071 respektive 0,48 µm. Största andel counts för järn kunde identifieras först vid en topp p̊a 0,36 % och sedan p̊a 0,57 % vid en diameter p̊a 0,48 µm respektive 2,0 µm. Det g̊ar även att se en ökning av counts hos magnesium mellan partikelstorlekarna 1,2 - 2,0 µm som avslutas i en topp p̊a 0,34 % med en mindre topp p̊a 0,48 % vid diametern 0,48 µm. Figur 19: Andel av den totala mängden uppmätta counts för olika metaller bland dieselproverna plottade mot partikeldiameter. Vid undersökningen av vedproverna ger koppar störst utslag vid de mindre diametrarna, vilket g̊ar att se i figur 20, med en topp p̊a 0,028 % counts vid diametern 0,022 µm, som sedan minskar med ökande partikelstorlek. Partiklarna som identifieras har en storlek mellan 0,022-0,75 µm. Övriga metaller har ett värde p̊a mindre än 0,01 % counts för samtliga storlekar. 23 Figur 20: Andel av den totala mängden uppmätta counts för olika metaller bland vedproverna plottade mot dess partikeldiameter. Utifr̊an de diagram som g̊ar att hitta under rubriken A2 i appendix kan man följa varje enskilt ämnes andel counts i de olika proverna för att lättare hitta trender specifika för ämnet. För litium kan man se ett samband mellan ökning i andel counts och ökning i diameter för broms- och vedpartiklarna medan dieselpartiklarna inte ger n̊agot utslag enligt figur A6. En liknande ökning kan ses även för magnesium bland b̊ade broms- och dieselpartiklarna där ved ger ett utslag nära noll enligt figur A7. För kalcium följer bromspartiklarna återigen samma trend med en ökning av andel counts i samband med en ökning av diameter medan dieselpartiklarna istället visar flera toppar fördelade mellan de olika storlekarna enligt figur A8. Även här ger inte kal- cium n̊agot utslag för vedpartiklarna. Krom, som kan ses i figur A9, har en upp̊atg̊aende trend bland dieselproverna medan utslaget fr̊an övriga källor är nära noll. Järn har en upp̊atg̊aende kurva för bromspartiklarna och för dieselpartiklarna men ger inget utslag för vedpartiklarna enligt figur A10. Koppars andel counts ökar ocks̊a med ökande diameter för b̊ade broms- och dieselpartiklarna, med en ned̊atg̊aende trend för vedproverna enligt figur A11. 24 5 Diskussion I diskussionen analyseras resultatet fr̊an studien och fr̊ageställningarna besvaras till största möjliga m̊an. En jämförelse görs mellan de detekterade partiklarna fr̊an de tre insamlingskällorna, där fokus ligger p̊a storlek, massa och inneh̊all. Baserat p̊a jämförelsen diskuteras eventuella hälsoeffekter partikelkällorna har p̊a människokroppen. 5.1 Storlek- och massjämförelse Genom att jämföra data fr̊an ELPI+ ang̊aende partiklarnas storleksfördelningar i figurerna 3, 5 och 7 kunde en topp hittas vid diametern 0,08 µm för diesel. Detta innebär att den partikelstorlek som dieselmotorn släpper ifr̊an sig störst antal av, 1, 45 · 106 partiklar/cm3, har en diameter p̊a 0,08 µm. För den högsta toppen i storleksdiagrammet för broms detekterades ungefär 1, 40 · 107 partiklar/cm3 vid en diameter av 0,02 µm. För ved visade den största toppen 1, 25 · 107 partiklar/cm3 för partiklar med diametern 0,015 µm. Ovanst̊aende värden g̊ar ej att jämföra med varandra p̊a grund av att partikelinsamlingarna fr̊an de tre källorna skedde under olika förutsättningar s̊asom olika exponeringstid och avst̊and till ELPI+. Hade insamlingen skett under lika förutsättningar för de tre partikelkällorna hade mängden utsläpp kunnat jämföras mellan dessa. I massfördelningsdiagrammet som presenteras i figur 4 för broms syns en topp vid diametern 3,0 µm med en stor total insamlad massa p̊a ungefär 4 mg/m3. Storleksfördelningsdiagrammet i figur 3 visar att antalet partiklar vid denna diameter (3 µm) är liten vilket innebär att broms släpper ut ett litet antal av dessa stora partiklar. Det g̊ar även att se att massfördelningsdiagrammet som presenteras i figur 4 har en mycket liten topp vid 0,02 µm. I storleks-fördelningsdiagrammet i figur 3 visas en hög topp vid samma diameter (0,02 µm) vilket innebär att broms släpper ifr̊an sig ett stort antal av dessa sm̊a partiklar. Figur 4 visar att den totala massan för partiklarna p̊a insamlingsytan vid 0,02 µm ungefär är 0,1 mg/m3. I massfördelningsdiagrammet som presenteras i figur 6 för ved syns en bred topp i ett diameterin- tervall p̊a ungefär 0,02 µm till 1,0 µm. Toppens högsta punkt ligger p̊a ungefär 0,55 mg/m3. I storleksfördelningsdiagrammet i figur 5 syns en l̊ag topp i samma diameterintervall vilket visar p̊a att det finns ett litet antal partiklar med denna massa. Det detekterades allts̊a ett f̊atal stora par- tiklar fr̊an vedprovet. I figur 6 syns en liten topp vid 0,015 µm. I storleksfördelningsdiagrammet för ved syns en hög topp vid ungefär 0,015 µm. Det kan allts̊a konstateras att ved inneh̊aller ett stort antal partiklar med en diameter runt 0,015 µm. Den totala vikten för de insamlade partiklarna vid denna diameter är ungefär 0,02 mg/m3. Massfördelningsdiagrammet som presenteras i figur 8 visar att dieselpartiklarna har en hög topp vid en diameter runt 2,2 µm. Vid jämförelse med figur 7 kan det konstateras att det finns ett litet antal partiklar med en diameter runt 2,2 µm. Den högsta toppen i figur 7 visar att det största antalet detekterade partiklar fr̊an dieselmotorn har en diameter runt 0,08 µm. Genom att jämföra detta med massfördelningsdiagrammet som presenteras i figur 8 syns att den partikelstorlek som dieselmotorn släpper ifr̊an sig flest av har en total massa p̊a ungefär 0,3 mg/m3. D̊a partikelinsamlingarna för källorna skedde under olika förutsättningar s̊asom olika expone- ringstid samt olika avst̊and till ELPI+-maskinen är det sv̊art att dra tillförlitliga slutsatser kring ovanst̊aende värden. Om man bortser fr̊an felkällor under insamlingen visar värdena att storleksfördelningen för vedkällan och bromskällan har lika karaktär d̊a diagrammen har toppar som ligger vid ungefär samma diameter. Tittar man däremot p̊a insamlingskällornas 25 massfördelningsdiagram samt jämför med antalet detekterade partiklar vid denna diameter, har bromspartiklarna en massa som är större än vedpartiklarnas. Dieselkällans storlek-och massfördelningsdiagram skiljer sig mycket ifr̊an ved- och bromskällan d̊a topparna ej befinner sig vid samma diameter. Den partikelstorlek som dieselmotorn släpper ifr̊an sig störst antal partiklar (1, 45 · 106 partiklar/cm3) har en total massa p̊a 0,3 mg/m3 där varje partikel har en diameter p̊a ungefär 0,08 µm. Dieselkällan släpper dessutom ifr̊an sig ett lägre antal partiklar (8, 0 · 105 partiklar/cm3) med en diameter p̊a 3,0 µm och en total massa p̊a 4,0 mg/m3. Den partikelstorlek som ved släpper ifr̊an sig mest av (1, 25 · 107 partiklar/cm3) har en diameter p̊a ungefär 0,015 µm och en total massa p̊a 0,02 mg/m3. Den partikeltyp som bilbromsen släpper ifr̊an sig i störst antal (1, 40 ·107 partiklar/cm3) har en totala massa p̊a 0,1 mg/m3 och diametern 0,02 µm. 5.2 Sammansättning i partiklarna Samtliga undersökta metaller gav i alla prover ett utslag p̊a < 1 % av andel counts, vilket betyder att inneh̊allet av dessa metaller i de olika källorna tros vara ganska l̊agt om vi antar att de bilder vi tog är representativa för hela provet. Det gick att notera att kurvan för kalcium och magnesium liknade varandra för bromsproverna enligt figur 18. Detta skulle kunna betyda att ämnena slits fr̊an samma del av bromsen. För ved var andelen counts av samtliga undersökta metaller väldigt l̊ag, vilket var förväntat. För dieselproverna kunde en ökning i counts ses bland majoriteten av de undersökta metallerna mellan diametern 1,2 µm och 2,0 µm. Detta skulle kunna betyda att det är början p̊a en upp̊atg̊aende trend med ökande diameter. För flera av ämnena gick det att detektera upp̊atg̊aende trender i andel counts i och med en ökning av partikelstorlek. Detta skulle kunna bero p̊a att metaller binder med en stark bindning, som jonbindning, och slits därför loss i större partiklar. Detta kan ocks̊a förklara varför b̊ade broms- och dieselpartiklarna hade ett större andel counts för de undersökta metallerna bland de större partiklarna än hos de mindre partiklarna. Vedpartiklar däremot, som inte inneh̊aller lika stora andelar metaller, har en mindre andel counts för de större partiklarna d̊a de troligtvis inte har denna typ av jonbindning i s̊a stor utsträckning. 5.2.1 Vedpartiklarnas inneh̊all Fr̊an vedpartiklarna kommer endast svag signal fr̊an de undersökta metallerna. Det är etablerat att vedpartiklars diameter är liten relativt de andra källorna, vilket innebär att de kommer l̊angt ner i lungorna. Som observerats återfinnas upprepade toppar i vedprovernas masspektra under resultat del 4.3. En hypotes är att dessa toppar härstammar ur närvaron av en mängd kombinationer av kol och väte i olika molekylfragment eftersom topparna återkommer med ett avst̊and p̊a 1,0 m/z. En alternativ hypotes är att dessa toppar skulle kunna komma fr̊an delvist pyrolyserade, oxiderade eller polymeriserade biomolekyler vilka återfinns i ved. I fall att denna hypotes stämmer borde det g̊a att observera en periodicitet med större intervall än 1,0 m/z, motsvarande en monomers massa. Som nämns i bakgrunden kan PAH bildas vid ofullständig förbränning. Vid eldning med ved borde det därför inte vara omöjligt att PAH bildas. Det behöver vidare studeras och fastställas ifall PAH återfinns i vedröken. 26 5.3 SIMCA observationer I resultatet g̊ar det att utläsa ur figur 13 att vedproverna separerar sig fr̊an övriga prover. Broms och diesel visar mindre tydlig separation och överlappar med varandra i scoresplotten. Att separationen är mindre mellan diesel- och bromspartiklar kan ha att göra med att deras inneh̊all sannolikt p̊averkas av liknande ämnen i dess omgivning. B̊ada källorna kan tänkas inneh̊alla sp̊ar av metaller vilka kommer fr̊an slitage av motor eller bromsen. En anledning till att klustret för vedpartiklar separerar sig mest fr̊an de andra källorna kan ha att göra med faktumet att dess inneh̊all är biobaserat. Det är därmed möjligt att sp̊ar fr̊an polymerer och organiska molekyler ger skilda utslag fr̊an diesel och broms, vilket kan vara en anledning till separationen som syns i scoresplotten. Vidare studier behövs för att undersöka detta närmare. Ett fenomen som visas tydligt i scoresplotten i figur 17 för vedproverna är att scores, som mot- svarar de olika partikelstorlekarna, har spritt sig längst en linje. Dessutom är de ordnade med avseende p̊a partikelstorlek: fr̊an liten till stor diameter. Vad detta beror p̊a behöver undersökas vidare för att kunna fastställas. Det uppvisade beteendet skulle kunna bero p̊a att de olika stor- lekarna av partiklar best̊ar av olika kemiska föreningar, eller att ett antal föreningar förekommer med större halt i partiklar av vissa storlekar. Det hade varit intressant att närmare undersöka de loadings i figur 17 som befinner sig längst fr̊an origo i y-led, d̊a dessa enligt modellen har stor betydelse. Detta för att se om dessa kemiska föreningar förekommer i högre eller lägre grad i de minsta respektive största partikelstorlekarna fr̊an förbränningen av ved. Även scores för partiklarna fr̊an bromsen p̊a elbilen har ett liknande linjärt utseende i scoresplotten i figur 15. För bromsproverna syns dock inte ett lika tydligt beteende som för vedproverna och endast övre halvan av partikelstorlekarna är ordnade i storleksordning. För dieselavgaserna g̊ar detta linje- formade beteende inte att observera i scoresplotten, men det g̊ar att utgöra vissa grupperingar för dieselavgaserna i figur 16. 5.4 Hälsoaspekter utifr̊an inneh̊all och storlek Som tidigare nämnts i avsnitt 2.1 bidrar partiklar med en diameter 2, 5 µm, (PM2,5), till en större hälsofara än större partiklar. Fr̊an resultaten i figurerna 3, 5 och 7 ligger alla toppar i de tre diagrammen i intervallet 0 − 2, 5 µm. Allts̊a är stor del av de insamlade partiklarna inom intervallet för PM2,5 och kan därför utgöra hälsofara. Hur stor hälsofara partikelkällorna utgör beror dock inte bara p̊a partiklarnas diameter. Avsnitt 2.2 beskriver hur stora partiklar med hög densitet har sv̊art att tränga sig djupt ner i lungvävnaden, medan mindre partiklar med hög densitet har det lättare. Större partiklar med l̊ag densitet har dock visat sig i vissa fall ha det lättare att ta sig djupare in i lungorna jämfört med sm̊a partiklar med hög densitet. Densitet spelar allts̊a stor roll för vilken grad partiklarna p̊averkar lungvävnaden. D̊a alla partiklar fr̊an alla källor antas ha lika stor densitet, 1000 kg/m3, finns inte underlag i denna studien för att vidare undersöka detta fenomen. Det som däremot kan diskuteras är den storleks- och massfördelning som insamlats för de olika partikelkällorna. Storleksfördelningen för vedkällan och bromskällan har lika karaktär d̊a figurerna 5 och 3 har toppar som ligger vid ungefär samma diameter: 0, 015− 0, 02 µm. Den största andelen partiklar hittades hos de prover inneh̊allande de mindre partikeldiametrarna. Den mindre diametern hos dessa partiklar innebär att de kan n̊a l̊angt ner i lungorna och skulle kunna göra skada. Trots att partiklarna är m̊anga till antal, är deras totala massa inte stor. Mängden partiklar, sett till massa, som krävs för att ha en betydande p̊averkan p̊a människors hälsa är inte känd. Det skulle kunna vara s̊a att dessa sm̊a partiklar inte har n̊agon betydande inverkan p̊a lungorna p̊a grund 27 av de totalt utgör en väldigt liten massa, men motsatsen är ocks̊a möjlig. Vidare hade det varit intressant att undersöka vilken koncentration av dessa sm̊a partiklar som utgör en hälsofara. För dieselavgaserna skiljer sig storleksfördelningen i figur 7 och massfördelningen i figur 8 mot motsvarande för ved och broms. Dieselavgaserna best̊ar av ett bredare spann av partikelstorlekar till skillnad fr̊an ved- och bromspartiklarna där majoriteten av partiklarna finns inom ett smalare diameterintervall. Detsamma gäller för massfördelningen i figur 8. Där p̊aträffas ett bredare intervall av diametrar jämfört med ved- och bromspartiklarna för vilka massfördelningarna är mer koncentrerade till smalare intervall av diametrar. Det är möjligt att denna breda fördelning av storlek och massa hos dieselpartiklarna gör att de p̊averkar större delar av lungan än ved- och bromspartiklarna. Detta skulle kunna innebära att de större partiklarna i dieselavgaserna fastnar i de övre regionerna i lungorna medan de mindre partiklarna tar sig längre ner. Vid analys av metallinneh̊allet av partiklarna detekterades m̊anga olika metaller. Dessa metaller gav däremot svag signal och det finns inte tillräckligt med underlag för att kvantifiera koncent- rationen av dessa i partiklarna. Det är sv̊art att dra n̊agra slutsatser ang̊aende om hur mycket partiklarnas metallinneh̊all p̊averkar hälsan. Flera av upptäckterna i denna studie hade varit intressanta att undersöka vidare med fokus p̊a hur partiklarna p̊averkar hälsan, bland annat hur stor roll partiklarnas metallinneh̊all spelar för dess hälsop̊averkan. 5.5 Felkällor Under arbetets g̊ang har felkällor uppkommit som har kunnat p̊averka resultatet. I följande stycken diskuteras n̊agra av dessa. I de laborativa delarna i studien var exempelvis exponerings- tiden för ELPI+ olika för de tre källorna. Dessutom var avst̊andet mellan insamlingspunkten och källan inte standardiserad. Dessa felkällor resulterar i att färre eller fler partiklar kan detekteras p̊a provytan p̊a grund av olika exponeringstid och avst̊and, vilket p̊averkar antalet partiklar som samlas in. Detta gör att vi inte kan presentera n̊agra resultat som jämför mängden utsläpp fr̊an källorna. Om provtagningen upprepas s̊a bör en standardiserad uppsamling tillämpas för att kunna jämföra vilken källa som bidrar med störst mängd partiklar. En annan felkälla vid insamlingen av proverna är väderförh̊allanden. Broms och dieselprover- na insamlades inomhus och p̊averkades inte av yttre väderförh̊allanden. Vedprovet insamlades utomhus, vilket innebär att även andra partiklar fr̊an utomhusluften kan ha samlats in. Under in- samlingen av bromspartiklar s̊a blev ELPI+ överbelastad vid tv̊a tillfällen vilket resulterade i tre uppdelningar av ELPI+ data fr̊an denna insamling. Konsekvensen blev att en liten mängd data försvann vid de tv̊a tillfällen som ELPI+ blev överbelastad. Detta anses dock inte ha p̊averkat resultatet nämnvärt. Väl i dataanalysen av proverna antogs densiteten för alla partiklar vara 1000 kg/m3. Detta är ett allmänt antagande som görs i mjukvaran kopplad till ELPI+. För att komplettera resultatet hade det varit givande att i efterhand kunna bestämma densiteten av partiklarna av olika storlekar, vilket hade kunnat uppn̊as med en v̊ag. I rapporten har de tre luftföroreningskällorna som analyserats antagits vara representativa för partikelkällor av samma typ. Dessa antaganden är bristande för samtliga källor. Den dieselmotorn som användes är av modell D13 fr̊an Volvo där driftparametrarna hos motorn var modifierade. Resultatet var att avgaserna inte är representativa för dagens dieselmotorer utan snarare för 20-30 år gamla modeller. Veden som förbrändes var endast av f̊a trädslag och bromsdiskarna som testades p̊a elbilen kan bara ge information om just den modellen av bromsdisk. 28 Under analysen av proverna i ToF-SIMS användes olika inställningar. De första proverna som analyserades var broms och här användes olika inställningar för att hitta en anpassning som fungerade bra för partikelfläckarna. Därefter användes samma inställningar för de bilder som togs för ved och diesel. Detta innebar att en del av bromsproverna behövde beskäras innan analysen i SIMCA. Eftersom olika ämnen joniseras olika i ToF-SIMS kan de grafer som relaterar till metallinneh̊all vara missvisande. Detta betyder att det inte med säkerhet g̊ar att dra slutsatser kring ämnenas förekomst. Exempelvis har ToF-SIMS en hög känslighet för natrium och kalium. Dessa tv̊a me- taller uppmättes p̊a samma sätt som övriga metaller i studien men ans̊ags ickerepresentativa p̊a grund av ToF-SIMS känslighet för dessa. Natrium och kalium har därmed valts att uteslutas fr̊an studien. När multivariat dataanalys utförs utefter en vald modell i SIMCA genereras ett DModX- diagramsom visualiserar avvikelser mellan enstaka datapunkter och modellen. Vid samtliga analyser uppvisade minst en datapunkt avvikande beteende fr̊an modellen, vilket innebar att ingen modell lyckades innefatta alla datapunkter. 5.6 Fortsatta studier För att öka tillförlitligheten av studiens resultat hade n̊agra förbättringar kunnat göras. ELPI+ visade sig tillsammans med tejpbeklädd aluminiumfolie vara en bra metod för uppsamling av partiklar. För att öka tillförlitligheten av resultatet hade dock fler och mer standardiserade insamlingar av partiklarna kunnat appliceras. Metodiken för att ta bilder med ToF-SIMS hade ocks̊a kunnat vara mer konsekvent. ToF-SIMS är ett avancerat verktyg men kan inte kopplas till externa databaser för identifieringshjälp och producerar mer kvalitativ snarare än kvantitativ data. För att vidare först̊a hälsoeffekterna av luftföroreningar behövs en kombination av flera olika analysinstrument användas för att bättre identifiera vilka ämnen partiklarna best̊ar av och kvantifiera dessa. Masspektrometri i kom- bination med vätskekromatografi (LC-MS) har med god provupparbetning möjlighet till att identifiera och kvantifiera enskilda ämnen. En LC-MS analys kan tänkas kompletteras väl med Inductively Coupled Plasma Masspektrometri (ICP-MS) i avseende p̊a att metallinneh̊all kan detekteras och kvantifieras med hög känslighet. Till en början var denna studie planerad att innefatta försök där en lungcellsmodell skulle ex- poneras för partiklarna, för att ge vidare insikt av partiklarnas hälsop̊averkan. Detta försök med lungceller skulle fortfarande vara ytterst intressant att genomföra. Under studiens g̊ang har, utöver metaller, även andra kemiska föreningar i partiklarna visat sig kunna spela roll för partiklarnas hälsop̊averkan. En grupp av föreningar som kan undersökas vidare är polycykliska aromatiska kolväten, d̊a dessa skulle kunna förekomma i partiklarna och kan vara cancerogena. 29 6 Slutsater Denna studie har undersökt luftburna partiklar fr̊an tre olika föroreningskällor: slitage av broms, förbränning av ved och avgaser fr̊an en dieselmotor. I studien har följande metaller undersökts djupare: litium, magnesium, kalcium, järn, koppar och krom. Resultaten som erh̊allits visar att partiklar fr̊an de studerade föroreningskällor skiljer sig åt i storleks- och massfördelning samt detekterat inneh̊all. Resultatet visar även att partiklarnas storlek p̊averkar deras sammansättning samt att metaller förekommer bland de insamlade partiklarna. Analysmetoden har inte genererat resultat som är tillräcklig för att dra slutsatser kring vilken mängd de olika metallerna förekommer p̊a partiklarna, eller vilka metaller som är vanligast förekommande. Det kunde dock med MVDA observeras en tydlig trend för inneh̊all i vedpartiklarna. Dieselpartiklarnas storleks- och massfördelning visade ett bredare diameterintervall jämfört med ved- och bromsproverna. P̊a grund av detta finns det en möjlighet att dieselpartiklarna p̊averkar större delar av lungvävnaden jämfört med ved- och bromsproverna d̊a deras diameterintervall var smalare. Det är dock sv̊art att dra slutsatser kring vilken föroreningskälla som utgör störst hälsop̊averkan eftersom insamlingarna för de tre källorna skedde under olika förutsättningar, s̊asom olika exponeringstid och avst̊and till ELPI+. För att kunna besvara dessa fr̊agor kring partiklarnas hälsop̊averkan m̊aste ytterligare studier utföras, exempelvis genom att exponera lungcellsmodeller för de insamlade partiklarna. 30 Källförteckning [1] Nationalencyklopedin. andning. url: https://www.ne.se/uppslagsverk/encyklopedi/ lC3A5ng/andning. [2] Guojun He, Tong Liu och Maigeng Zhou. ”Straw burning, PM2.5, and death: Evidence from China”. I: Journal of Development Economics 145 (juni 2020), s. 102468. doi: 10. 1016/J.JDEVECO.2020.102468. [3] World Health Organization. WHO global air quality guidlines. 2021. url: https://apps. who.int/iris/bitstream/handle/10665/345334/9789240034433-eng.pdf. [4] World Health Organization. One third of global air pollution deaths in Asia Pacific. Maj 2018. url: https://www.who.int/westernpacific/news/item/02-05-2018-one- third-of-global-air-pollution-deaths-in-asia-pacific. [5] A. Miazgowicz, K. Krennhuber och C. Lanzerstorfer. ”Metals concentrations in road dust from high traffic and low traffic area: a size dependent comparison”. I: International Journal of Environmental Science and Technology 17 (7), s. 3365–3372. doi: 10.1007/S13762- 020-02667-3/FIGURES/4. [6] Pranay P. Morajkar m. fl. ”Transmission of trace metals from fuels to soot particles: An ICP-MS and soot nanostructural disorder study using diesel and diesel/Karanja biodiesel blend”. I: Fuel 280 (nov. 2020), s. 118631. doi: 10.1016/J.FUEL.2020.118631. [7] Livsmedelsverket. Polycykliska aromatiska kolväten (PAH). Mars 2022. url: https:// www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/oonskade-amnen/miljogifter/ polycykliska-aromatiska-kolvaten-pah. [8] Översyn av EU:s luftkvalitetsdirektiv Fakta-pm om EU-förslag 2022/23:FPM20 COM(2022) 542 final - Riksdagen. url: https://www.riksdagen.se/sv/dokument-lagar/dokument/ fakta-pm-om-eu-forslag/oversyn-av-eus-luftkvalitetsdirektiv_HA06FPM20. [9] Polina Maciejczyk, Lung Chi Chen och George Thurston. ”The Role of Fossil Fuel Com- bustion Metals in PM2.5 Air Pollution Health Associations”. I: Atmosphere 2021, Vol. 12, Page 1086 12 (9), s. 1086. doi: 10.3390/ATMOS12091086. [10] Naturv̊ardsverket. Metaller som miljögift. url: https://www.naturvardsverket.se/ amnesomraden/miljofororeningar/metaller/. [11] Kouji Adachi och Yoshiaki Tainosho. ”Characterization of heavy metal particles embedded in tire dust”. I: Environment International 30 (8 okt. 2004), s. 1009–1017. doi: 10.1016/ J.ENVINT.2004.04.004. [12] Livsmedelsverket. Giftiga metaller - provtagning - Kontrollwiki. April 2022. url: https:// kontrollwiki.livsmedelsverket.se/artikel/119/giftiga-metaller-provtagning. [13] Naturv̊ardsverket. Krom (Cr). url: https://utslappisiffror.naturvardsverket.se/ sv/Amnen/Tungmataller/Krom/. [14] Naturv̊ardsverket. Fakta om koppar. url: https : / / www . naturvardsverket . se / amnesomraden/miljofororeningar/metaller/fakta-om-koppar/. [15] Livsmedelsverket. Järn. url: https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel- och- innehall/naringsamne/salt-och-mineraler1/jarn. [16] Sveriges lantbruksuniversitet. ”Växter som en källa till järn i maten”. I: (). url: https: //stud.epsilon.slu.se/6090/7/soderberg_breivik_k_130925.pdf. 31 https://www.ne.se/uppslagsverk/encyklopedi/lC3A5ng/andning https://www.ne.se/uppslagsverk/encyklopedi/lC3A5ng/andning https://doi.org/10.1016/J.JDEVECO.2020.102468 https://doi.org/10.1016/J.JDEVECO.2020.102468 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/345334/9789240034433-eng.pdf https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/345334/9789240034433-eng.pdf https://www.who.int/westernpacific/news/item/02-05-2018-one-third-of-global-air-pollution-deaths-in-asia-pacific https://www.who.int/westernpacific/news/item/02-05-2018-one-third-of-global-air-pollution-deaths-in-asia-pacific https://doi.org/10.1007/S13762-020-02667-3/FIGURES/4 https://doi.org/10.1007/S13762-020-02667-3/FIGURES/4 https://doi.org/10.1016/J.FUEL.2020.118631 https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/oonskade-amnen/miljogifter/polycykliska-aromatiska-kolvaten-pah https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/oonskade-amnen/miljogifter/polycykliska-aromatiska-kolvaten-pah https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/oonskade-amnen/miljogifter/polycykliska-aromatiska-kolvaten-pah https://www.riksdagen.se/sv/dokument-lagar/dokument/fakta-pm-om-eu-forslag/oversyn-av-eus-luftkvalitetsdirektiv_HA06FPM20 https://www.riksdagen.se/sv/dokument-lagar/dokument/fakta-pm-om-eu-forslag/oversyn-av-eus-luftkvalitetsdirektiv_HA06FPM20 https://doi.org/10.3390/ATMOS12091086 https://www.naturvardsverket.se/amnesomraden/miljofororeningar/metaller/ https://www.naturvardsverket.se/amnesomraden/miljofororeningar/metaller/ https://doi.org/10.1016/J.ENVINT.2004.04.004 https://doi.org/10.1016/J.ENVINT.2004.04.004 https://kontrollwiki.livsmedelsverket.se/artikel/119/giftiga-metaller-provtagning https://kontrollwiki.livsmedelsverket.se/artikel/119/giftiga-metaller-provtagning https://utslappisiffror.naturvardsverket.se/sv/Amnen/Tungmataller/Krom/ https://utslappisiffror.naturvardsverket.se/sv/Amnen/Tungmataller/Krom/ https://www.naturvardsverket.se/amnesomraden/miljofororeningar/metaller/fakta-om-koppar/ https://www.naturvardsverket.se/amnesomraden/miljofororeningar/metaller/fakta-om-koppar/ https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/naringsamne/salt-och-mineraler1/jarn https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/naringsamne/salt-och-mineraler1/jarn https://stud.epsilon.slu.se/6090/7/soderberg_breivik_k_130925.pdf https://stud.epsilon.slu.se/6090/7/soderberg_breivik_k_130925.pdf [17] Calle Björned. ”Luftföroreningar kan öka risken för demens: ’ ”Hjärnan krymper””. I: SVT Nyheter (febr. 2020). url: https : / / www . svt . se / nyheter / vetenskap / luftfororeningar-kan-oka-risken-for-demens-hjarnan-krymper. [18] PubChem. Lithium. url: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/3028194. [19] Livsmedelsverket. Kalcium. url: https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och- innehall/naringsamne/salt-och-mineraler1/kalcium. [20] Livsmedelsverket. Magnesium. url: https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel- och-innehall/naringsamne/salt-och-mineraler1/magnesium. [21] PubChem. Magnesium. url: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5462224. [22] Livsmedelsverket. Polycykliska aromatiska kolväten (PAH). Mars 2022. url: https:// www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/oonskade-amnen/miljogifter/ polycykliska-aromatiska-kolvaten-pah. [23] Arbetsmiljöverket. Kvarts-damm, damm, rök och dimma. 2021. url: https://www.av. se/halsa-och-sakerhet/kemiska-risker-och-luftfororeningar/damm-rok-och- dimma/. [24] Chantal Darquenne. ”Deposition Mechanisms”. I: Journal of Aerosol Medicine and Pul- monary Drug Delivery 33 (4 aug. 2020), s. 181–185. doi: 10.1089/JAMP.2020.29029.CD/ ASSET/IMAGES/LARGE/JAMP.2020.29029.CD_FIGURE5.JPEG. [25] Qihong Deng m. fl. ”Particle deposition in the human lung: Health implications of particu- late matter from different sources”. I: Environmental Research 169 (febr. 2019), s. 237–245. doi: 10.1016/J.ENVRES.2018.11.014. [26] A. Järvinen m. fl. ”Calibration of the new electrical low pressure impactor (ELPI+)”. I: Journal of Aerosol Science 69 (2014), s. 150–159. doi: 10.1016/J.JAEROSCI.2013.12.006. [27] Dekati. ELPI+ brochure. 2022. url: https://www.dekati.com/wp-content/uploads/ dekati_elpi_brochure.pdf. [28] Dekati. ELPI+ User Manual ver. 1.12. Tampere, Finland, 2011. [29] Nationalencyklopedin. masspektrometri - Uppslagsverk - NE.se. url: https://www.ne. se/uppslagsverk/encyklopedi/l%C3%A5ng/masspektrometri. [30] David W. Mogk. Time-of-Flight Secondary Ion Mass Spectrometry (ToF-SIMS). Dec. 2022. url: https://serc.carleton.edu/207678. [31] Jialin Liu. ”Process Monitoring Using Bayesian Classification on PCA Subspace”. I: In- dustrial and Engineering Chemistry Research 43 (24 nov. 2004), s. 7815–7825. doi: 10. 1021/IE0498495. [32] Takato Ishida m. fl. ”Network Degradation Assessed by Evolved Gas Analysis-Mass Spectrometry Combined with Principal Component Analysis (EGA-MS-PCA): A Case of Thermo-Oxidized Epoxy/Amine Network”. I: Macromolecules 56 (3 jan. 2023), s. 883– 891. doi: 10.1021/ACS.MACROMOL.2C02383. [33] U. Roessner m. fl. ”Metabolomics – The Combination of Analytical Biochemistry, Biology, and Informatics”. I: Comprehensive Biotechnology, Second Edition 1 (jan. 2011), s. 447– 459. doi: 10.1016/B978-0-08-088504-9.00052-0. [34] What Is Principal Component Analysis (PCA) and How It Is Used? url: https://www. sartorius.com/en/knowledge/science-snippets/what-is-principal-component- analysis-pca-and-how-it-is-used-507186. 32 https://www.svt.se/nyheter/vetenskap/luftfororeningar-kan-oka-risken-for-demens-hjarnan-krymper https://www.svt.se/nyheter/vetenskap/luftfororeningar-kan-oka-risken-for-demens-hjarnan-krymper https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/3028194 https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/naringsamne/salt-och-mineraler1/kalcium https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/naringsamne/salt-och-mineraler1/kalcium https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/naringsamne/salt-och-mineraler1/magnesium https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/naringsamne/salt-och-mineraler1/magnesium https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5462224 https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/oonskade-amnen/miljogifter/polycykliska-aromatiska-kolvaten-pah https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/oonskade-amnen/miljogifter/polycykliska-aromatiska-kolvaten-pah https://www.livsmedelsverket.se/livsmedel-och-innehall/oonskade-amnen/miljogifter/polycykliska-aromatiska-kolvaten-pah https://www.av.se/halsa-och-sakerhet/kemiska-risker-och-luftfororeningar/damm-rok-och-dimma/ https://www.av.se/halsa-och-sakerhet/kemiska-risker-och-luftfororeningar/damm-rok-och-dimma/ https://www.av.se/halsa-och-sakerhet/kemiska-risker-och-luftfororeningar/damm-rok-och-dimma/ https://doi.org/10.1089/JAMP.2020.29029.CD/ASSET/IMAGES/LARGE/JAMP.2020.29029.CD_FIGURE5.JPEG https://doi.org/10.1089/JAMP.2020.29029.CD/ASSET/IMAGES/LARGE/JAMP.2020.29029.CD_FIGURE5.JPEG https://doi.org/10.1016/J.ENVRES.2018.11.014 https://doi.org/10.1016/J.JAEROSCI.2013.12.006 https://www.dekati.com/wp-content/uploads/dekati_elpi_brochure.pdf https://www.dekati.com/wp-content/uploads/dekati_elpi_brochure.pdf https://www.ne.se/uppslagsverk/encyklopedi/l%C3%A5ng/masspektrometri https://www.ne.se/uppslagsverk/encyklopedi/l%C3%A5ng/masspektrometri https://serc.carleton.edu/207678 https://doi.org/10.1021/IE0498495 https://doi.org/10.1021/IE0498495 https://doi.org/10.1021/ACS.MACROMOL.2C02383 https://doi.org/10.1016/B978-0-08-088504-9.00052-0 https://www.sartorius.com/en/knowledge/science-snippets/what-is-principal-component-analysis-pca-and-how-it-is-used-507186 https://www.sartorius.com/en/knowledge/science-snippets/what-is-principal-component-analysis-pca-and-how-it-is-used-507186 https://www.sartorius.com/en/knowledge/science-snippets/what-is-principal-component-analysis-pca-and-how-it-is-used-507186 [35] Li Yang m. fl. ”Data Analysis for the Laboratory and Chemical Plant”. I: Analytical Che- mistry 77 (14), s. 4654–4661. doi: 10.1021/ac050307m. [36] Bonnie J. Tyler, Gaurav Rayal och David G. Castner. ”Multivariate analysis strategies for processing ToF-SIMS images of biomaterials”. I: Biomaterials 28 (15 maj 2007), s. 2412– 2423. issn: 0142-9612. doi: 10.1016/J.BIOMATERIALS.2007.02.002. [37] Michael Taylor m. fl. ”Partial least squares regression as a powerful tool for investigating large combinatorial polymer libraries”. I: Surf Interface Anal 41 (2 2009), s. 127–135. doi: 10.1002/sia.2969. [38] SIMCA 15 User Guide. url: https://www.sartorius.com/download/544940/simca- 15-user-guide-en-b-00076-sartorius-data.pdf. [39] Piotr S. Gromski m. fl. ”A tutorial review: Metabolomics and partial least squares- discriminant analysis – a marriage of convenience or a shotgun wedding”. I: Analytica Chimica Acta 879 (2015), s. 10–23. doi: 10.1016/j.aca.2015.02.012. [40] Scott E. Lewis. ”An introduction to nonparametric statistics in chemistry education rese- arch”. I: ACS Symposium Series 1166 (2014), s. 115–133. issn: 19475918. doi: 10.1021/BK- 2014-1166.CH007/ASSET/IMAGES/MEDIUM/BK-2013-00378D_G013.GIF. [41] StatisticsHowTo. Kruskal Wallis H Test: Definition, Examples, Assumptions, SPSS - Statistics How To. url: https : / / www . statisticshowto . com / probability - and - statistics/statistics-definitions/kruskal-wallis/#assumptions. [42] Tae Kyun Kim. ”Understanding one-way ANOVA using conceptual figures”. I: Korean Journal of Anesthesiology 70 (2017), s. 22–26. url: http://ekja.org. [43] StatisticsHowTo. Dunn’s test: Definition. url: https://www.statisticshowto.com/ dunns-test/. 33 https://doi.org/10.1021/ac050307m https://doi.org/10.1016/J.BIOMATERIALS.2007.02.002 https://doi.org/10.1002/sia.2969 https://www.sartorius.com/download/544940/simca-15-user-guide-en-b-00076-sartorius-data.pdf https://www.sartorius.com/download/544940/simca-15-user-guide-en-b-00076-sartorius-data.pdf https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.02.012 https://doi.org/10.1021/BK-2014-1166.CH007/ASSET/IMAGES/MEDIUM/BK-2013-00378D_G013.GIF https://doi.org/10.1021/BK-2014-1166.CH007/ASSET/IMAGES/MEDIUM/BK-2013-00378D_G013.GIF https://www.statisticshowto.com/probability-and-statistics/statistics-definitions/kruskal-wallis/#assumptions https://www.statisticshowto.com/probability-and-statistics/statistics-definitions/kruskal-wallis/#assumptions http://ekja.org https://www.statisticshowto.com/dunns-test/ https://www.statisticshowto.com/dunns-test/ A1 Hantering av prover fr̊an ELPI+ Nedan följer n̊agra bilder p̊a den utrustning och uppställning som använts för studien. Först, i figur A1, visas tv̊a av de aluminiumfolier med tejp p̊a som använts som uppsamlingsytor i ELPI+ efter att insamlingen av vedpartiklar skett. Figur A1: Aluminiumfolie 6 och 7 fr̊an partikelinsamlingen för ved. De olika mönster som blir p̊a folierna kommer av att munstyckerna ser olika ut för de olika stegen i kaskadimpakotorn. I figur A2 visas hur munstycke 12 ser ut, samma mönster som är i munstycket återspeglas allts̊a p̊a uppsamlingsyta 12 under munstycket. Figur A2: Munstycke 12 fr̊an kaskadimpaktorn i ELPI+. Den andra delen av segmentet, allts̊a uppsamlingsplattan g̊ar att se i figur A3. I mitten av uppsamlingsplattan kan även uppsamlingsytan med insamlade partiklar fr̊an dieselmotorn ses. Figur A3 visar uppsamlingsplatta 4 och 5. I Figur A3: Uppsamlingsplatta för prov 4 och 5 fr̊an partikelinsamlingen för diesel. När samtliga segment staplas p̊a varandra i ordning s̊a är kaskadimpaktorn komplett och ser ut som i figur A4. Impaktorn placeras sedan i resten av ELPI+ för insamling av partiklar. II Figur A4: Kaskadimpaktorn fr̊an ELPI+. I figur A5 visas hur grillplatsen vid vilken partiklarna fr̊an vedeldningen insamlades. Bakom grillplatsen kan även vagnen, p̊a vilken ELPI+ var placerad, urskiljas. III Figur A5: Upplägg för insamling av partiklar fr̊an vedeldning. IV A2 XVar- plottar Nedan i figur A6- A11 visas grafer där andelen counts för varje undersökt metall är uppmätt för samtliga prover. Dessa grafer visar ämnets förh̊allandet mellan de olika proverna och inte dess faktisk koncentration eller n̊agon procentsats för mängd ämne i proven utan endast andel counts. Figur A6: Litiums andel counts för samtliga prover. Figur A7: Magnesiums andel counts för samtliga prover. V Figur A8: Kalciums andel counts för samtliga prover. Figur A9: Krom andel counts för samtliga prover. VI Figur A10: Järns andel counts för samtliga prover. Figur A11: Koppars andel counts för samtliga prover. VII A3 Python-kod Shapiro-Wilks test Nedan följer koden som användes för att undersöka vilka populationer som var normalfördelade med Shapiro-Wilks test. import pandas as pd from scipy.stats import shapiro #Klass för färger. class bcolors: HEADER = '\033[95m' OKBLUE = '\033[94m' OKCYAN = '\033[96m' OKGREEN = '\033[92m' WARNING = '\033[93m' FAIL = '\033[91m' ENDC = '\033[0m' BOLD = '\033[1m' UNDERLINE = '\033[4m' #p0-värde för normalfördelning alpha = 0.05 print('Laddar data ...') #Ladda bromsdata. df_broms = pd.read_excel('broms.xlsx') #Ladda dieseldata. df_diesel = pd.read_excel('diesel.xlsx') #Ladda veddata. df_ved = pd.read_excel('ved.xlsx') #Ladda blankdata. df_blank = pd.read_excel('blank.xlsx') antalNorm = 0